目的探讨维生素D₃（VD₃）在烹调油烟细颗粒物(COFs-derived PM_2.5)暴露对人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）体外小管形成损伤中的作用,探讨VD₃抑制COFs-derived PM_2.5暴露所致脐带血管损伤中的相关细胞学分子机制,为进一步研究VD₃抑制COFs-derived PM_2.5对脐带血管损伤提供新的证据,扩宽VD₃的临床应用范围。方法1.用采样器采集COFs-derived PM_2.5,并配制成浓度为100mg/m L的存储液。2.不同浓度COFs-derived PM_2.5（0μg/m L、25μg/m L、50μg/m L、100μg/m L、150μg/m L和200μg/m L）作用于HUVECs 12h、24h和36h后,用Microtetrazoline（MTT）方法检测COFs-derived PM_2.5对HUVECs存活率的影响;3.将HUVECs暴露于0、100μg/m L PM_2.5、1000nmol/L VD₃+100μg/m L PM2和1000nmol/L VD₃ 24h后,用体外小管形成实验检测VD₃和COFs-derived PM_2.5暴露对HUVECs体外小管形成的影响,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位。4.将HUVECs暴露于0、100μg/m L PM_2.5、1000nmol/L VD₃+100μg/m L PM_2.5和1000nmol/L VD₃ 12h、24h和36h后,用DCFH-DA染色法检测细胞活性氧（ROS）水平以及用Mito SOX?染色法检测细胞线粒体内ROS的水平;5.将HUVECs暴露于0、100μg/m L PM_2.5、1000nmol/L VD₃+100μg/m L PM_2.5和1000nmol/LVD₃ 24h后,用ELISA方法检测细胞分泌的IL-1β、IL-18以及VEGF蛋白的表达情况;用WB和RT-PCR方法检测NLRP3炎症小体和VEGF蛋白以及m RNA表达情况;结果1.COFs-derived PM_2.5暴露可使HUVECs存活率呈剂量依赖性和时间依赖性降低;2.COFs-derived PM_2.5暴露可抑制HUVECs体外小管的形成,VD₃共孵育后可改善体外小管形成情况。3.COFs-derived PM_2.5暴露可使HUVECs内ROS水平以及线粒体ROS水平显著上升,VD₃共同孵育以后可使HUVECs内ROS水平以及线粒体ROS水平明显降低;4.COFs-derived PM_2.5暴露可使细胞内红色荧光强度明显减弱,绿色荧光强度显著增加;而VD₃与PM_2.5共同孵育则可以显著增强红色荧光强度,降低绿色荧光强度;5.COFs-derived PM_2.5的暴露可使HUVECs分泌的IL-18和IL-1β蛋白水平上升,VEGF蛋白水平下降,VD₃共孵育可有效抑制IL-18和IL-1β的分泌,促进VEGF的分泌;与对照组相比,COFs-derived PM_2.5的暴露可使HUVECs内NLRP3、caspase-1、IL-18和IL-1β炎症小体的蛋白以及m RNA的表达升高,VD₃共孵育可有效抑制NLRP3、caspase-1、IL-18和IL-1β炎症小体蛋白以及m RNA的表达水平升高;COFs-derived PM_2.5的暴露可使HUVECs中VEGF的蛋白以及m RNA的表达降低,VD₃共孵育后可促进VEGF蛋白以及m RNA的表达升高;结论本研究证明VD₃可抑制COFs-derived PM_2.5对HUVECs损伤并揭示可能相关机制,提示ROS/NLRP3/VEGF信号通路在VD₃抑制COFs-derived PM_2.5对HUVECs损伤中的作用,为VD₃干预不良妊娠结局提供了的依据,拓宽了VD₃的临床应用范围。