【摘 要】
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随着饲料抗生素的禁用,绿色添加剂在家畜生产中的作用受到了更多重视。Lcarnitine（左旋肉碱,简称LC）作为一种绿色营养添加剂,是动物机体脂肪形成过程中重要的运载工具和作为补充能量的手段,可缓解机体氧化应激状态,但其调节机制尚不明确。本试验旨在通过Nrf2信号通路探究左旋肉碱对育肥羔羊脂肪组织抗氧化功能的影响,以明确营养物质左旋肉碱介导脂肪组织抗氧化作用的机理,为预防育肥羊的氧化应激性疾病奠定
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（项目编号:31702140）；
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随着饲料抗生素的禁用,绿色添加剂在家畜生产中的作用受到了更多重视。Lcarnitine（左旋肉碱,简称LC）作为一种绿色营养添加剂,是动物机体脂肪形成过程中重要的运载工具和作为补充能量的手段,可缓解机体氧化应激状态,但其调节机制尚不明确。本试验旨在通过Nrf2信号通路探究左旋肉碱对育肥羔羊脂肪组织抗氧化功能的影响,以明确营养物质左旋肉碱介导脂肪组织抗氧化作用的机理,为预防育肥羊的氧化应激性疾病奠定基础。本试验选择采用24只体型匀称、体重差别不大的3月龄断奶夏洛莱和小尾寒羊杂交F1代（夏寒F1代）公羔羊作为试验动物,随机分为3组,每个处理组8只育肥羔羊,每个重复1只羔羊,即对照组（Control组,饲喂TMR）、低浓度左旋肉碱组（LLC组,饲喂TMR+0.01%LC）、高浓度左旋肉碱组（H-LC组,饲喂TMR+0.05%LC）,以粗精比3:7的日粮模式饲喂。试验预饲期15d,正式期45d。通过检测左旋肉碱对夏寒F1代血液中抗氧化指标、脂肪组织中抗氧化基因表达的影响,同时比较脂肪组织蛋白组学差异。在此基础上,通过体外培养夏寒F1代育肥羔羊原代脂肪细胞模型,进一步验证了左旋肉碱对育肥羔羊白色脂肪细胞的Nrf2信号通路抗氧化作用的变化,为阐明日粮中外源性添加左旋肉碱对育肥羔羊抗氧化功能的影响提供基础。试验结果表明:1.添加左旋肉碱对育肥羔羊血液中抗氧化指标的影响。结果显示添加左旋肉碱的夏寒F1代血浆中MDA含量要极显著低于对照组（P＜0.01）,而SOD活性显著高于对照组（P＜0.05）,GSH-Px活性要极显著高于对照组（P＜0.01）;并且在F1代的腹部脂肪组织中抗氧化HO-1、SOD、Nrf2、GST m RNA的表达量都有显著升高（P＜0.05）。这些结果表明左旋肉碱可以提高夏寒F1代机体抗氧化功能。2.添加左旋肉碱对育肥羔羊脂肪组织蛋白组学差异结果表明,共鉴定出57个上调蛋白表达,303个下调蛋白表达。其中与抗氧化应激相关通路包括流体剪切应力与动脉粥样硬化、肝细胞癌、内质网中的蛋白质加工、帕金森病、癌症通路、化学致癌作用-活性氧物种、脂质与动脉粥样硬化。通过Western Blotting检测Nrf2信号通路关键抗氧化因子Nrf2、HO-1、keap1的蛋白表达量发现,添加左旋肉碱组都显著高于对照组（P＜0.01）。结果说明左旋肉碱可以通过作用夏寒F1代脂肪组织来提高机体抗氧化功能。3.采用体外培养育肥羔羊原代前体脂肪细胞模型,添加左旋肉碱处理脂肪细胞,发现Nrf2和Keap1蛋白表达量左旋肉碱组都高于对照组（P＜0.01）。结果表明左旋肉碱可以通过Nrf2信号通路提高脂肪组织的抗氧化能力。综上所述,本研究表明左旋肉碱能够有效提高杂交绵羊脂肪细胞的抗氧化能力,降低氧化应激对机体带来的影响,对夏寒F1代的生长发育起到促进作用。
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