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该研究的目的是利用腺相关病毒载体对多巴胺合成过程中的三种相关酶基因进行克隆表达,并检测三种相关基因表达后的联合酶促反应能力,可进一步应用于帕金森病基因联合治疗.分别构建携带酪氨酸羟化酶(TH)、芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)及鸟苷酸环化水解酶-I(GCH-I)基因的腺相关病毒(AAV)载体rAAV/TH、rAAV/AADC和rAAV/GCH-I,用磷酸钙介导方法将三种质粒共转染于HEK-293包装细胞,获得了高滴度的具有感染活力的AAV-TH、AAV-AADC、AAV-GCHI病毒颗粒,收集病毒上清并感染猴肾成纤维细胞(COS-7),以原位杂交、免疫组化方法测定TH、AADC和GCHI基因在COS-7细胞中的表达.高压液相色谱-电化学检测上述细胞在加入各自底物后多巴胺的生成量,借以了解重组表达的TH、AADC及GCHI基因的功能活性.该研究为进一步应用TH、AADC和GCHI联合基因进行细胞移植基因治疗帕金森病奠定了基础.