目的 β连环素(β-catenin)是WNT信号传导通路中的重要分子，同时也通过上皮钙粘素-连环素复合体(E-cadherin／catenin complex)参与构成细胞粘附系统。由于β-catenin在细胞增殖和粘附过程中的双重作用，已成为肿瘤发生发展机制研究中的热点。本实验采用免疫组化法检测β-cat及E-cd在肝细胞癌中的表达，探讨二者的表达与肝癌及相关临床和病理学因素间的关系，以及二者在肝癌中表达的关系。 材料与方法 1．标本 72例肝癌组织标本取自中国医科大学附属二院1994-2001年手术切除之标本，经病理证实为原发性肝细胞癌，根据HE染色结果筛选标本皆伴有癌旁非癌肝组织。另选20例肝硬化标本与癌旁组织共同作为正常对照。标本均用福尔马林固定，石蜡包埋，常规连续石蜡切片，厚4微米，每个腊块切片3张，两张免疫组化染色，另一张HE染色。 2．方法及试剂 采用免疫组化S-P法，鼠抗人单克隆β-catenin抗体(1：800)购自美国Transduction公司。鼠抗人单克隆即用型E-caderin抗体及SP试剂盒，DAB显色剂均为福州迈新公司产品。用已知正常的肝组织标本作阳性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。每例癌标本取两张石蜡切片，常规脱蜡至水。3％的过氧化氢-甲醇孵育30分钟，此后进行抗原修复，3％正常山羊血清孵育后，两张切片分别加入适当稀释的E-cd一抗和β-cat一抗，4℃过夜。分别加相应的H抗门：100人孵育20分钟（室温厂DAB显色，自来水冲洗，苏木素复染透明、中性树胶封片。 3．结果判断及统计学处理 免疫组化阳性信号为棕黄色细小颗粒状，每张切片选5个高倍视野，每高倍视野计数100个瘤细胞。p－cat染色结果判断标准按照Maruyama等的方法，分别从细胞膜，细胞浆，细胞核三方面判断 p－Cat在细胞内的分布特征：＞70％的癌细胞细胞膜阳性为正常表达，反之为表达缺失；＞10％的癌细胞细胞浆、细胞核阳性为胞浆或胞核阳性表达；胞浆或胞核阳性表达称为异位表达。细胞膜表达异常，胞浆或胞核阳性表达统称为表达异常。E－cad染色结果以＞爪阮的癌细胞细胞膜阳性为正常表达，反之为表达缺失。 统计采用 SPSS软件八‘检验，P＜0．05时有统计学意义 结 果 l·P－cat和E－cd在不同组织中的表达 癌旁肝细胞与肝硬化标本中E－Cd，P－Cat基本在细胞膜表达，于细胞浆及细胞核不表达，且二者间的E－cd和么－cat染色均无明显统计学差异，Pscn＝0．559，P。＾，＝0．983。癌细胞的 E－Cd染色异常表现为膜表达减弱或缺失，p－Cat染色异常表现为膜表达减弱或缺失，胞浆胞核表达（异位表达人癌细胞与癌旁肝细胞及肝硬化肝细胞的E－Cd和p－C8t染色结果均存在明显统计学差异，肝癌与肝硬化间巳m＜o．＊八巳川＜o．皿二肝癌与癌旁组织间 PscnJ．皿1，Pc＾，＜O．皿1。 2．肝癌中p－cat与E－cd表达的关系 72例肝癌组织标本，在44例 E－Cd表达异常的病例中， 3．6－Cat，E－Cd表达与肝癌临床、病理指标间关系 按Edlnondson分级，将肝癌病例分为高分化（I＋11）和低分化（皿十IV）两组，p－cat和 E－cd的异常表达率随肝癌细胞分化程度的下降而增高，高分化癌细胞与低分化间Pn。＝0．001，P以T＝0．001，差异有统计学意义。在具有门静脉癌栓的病例中，E－Cd表达异常率显著增高，与无门静脉癌栓病例相比，P＝0．007，具有显著的统计学差异。存在门静脉癌栓的病例组中p－cat异常表达与无门静脉癌栓组相比，PJ．163，无统计学差异。其他各参数如年龄，性别，是否感染肝炎病毒，肿瘤大小，有无包膜AFP，组织学分型，是否存在卫星灶组未见明确统计学差异。 结 论 ＊肝癌中p－cat和E－cd的异常表达明显高于肝硬化和癌旁组织。 2．肝细胞癌中，E－Cd异常表达与p－Cat的异位表达呈正相关。 3．p－cat和E－cd的异常表达与癌组织分化程度呈负相关。 4．E－Cd的异常表达与肝癌是否存在门脉癌栓相关。 5．p－cat和E－cd的表达与肝癌组织分型，肿瘤大小等因素无关