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目的:临床观察及实验研究已明确丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注后损伤有保护作用,但其具体机制仍不完全清楚,而自噬作为细胞内复杂的生物过程,对细胞的生存、死亡均具有重要作用。本实验旨在探讨自噬对脑缺血再灌注损伤后的作用,丁苯酞的神经保护作用是否是通过影响自噬反应来完成的及其可能的机制,为临床用药提供依据。方法:随机选择36只成年雄性SD大鼠并将它们随机分配到假手术组、丁苯酞治疗组、模型组,每组12只。模型组及治疗组用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO)模型,假手术组只分离血管不插入线栓。治疗组于缺血1h后给予丁苯酞溶液(0.1g丁苯酞软胶囊溶解于100ml tween80溶液)腹腔注射(80mg/kg),模型组于缺血1h后腹腔注射等容积tween80溶液。于脑缺血2h后再灌注,24小时后处死。神经功能缺损评分通过Longa评分法来完成;大鼠脑梗死体积测定采用TTC染色法;用免疫组化法(SABC法)检测各组大鼠脑组织p53、mTOR、Beclin-1、Lc3阳性表达;HE染色法观察确定脑组织结构形态学变化。实验数据以均数±标准差表示,多组比较用方差分析,两样本比较用t检验;P<0.05为差异有统计学意义。结果:假手术组大鼠无四肢活动异常,走路偏斜等神经系统缺损症状。治疗组神经功能缺损评分较模型组低;假手术组未见脑梗死病灶,治疗组脑梗死体积较模型组小(P<0.05)。与假手术组相比,模型组和治疗组p53、mTOR、Beclin-1及LC3表达阳性细胞均增多(P<0.05);治疗组p53表达阳性细胞数明显比模型组减少(P<0.05);与模型组相比,治疗组mTOR表达阳性细胞数明显升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组自噬相关蛋白Beclin-1、Lc3表达阳性细胞数明显降低(P<0.05)。HE染色假手术组大鼠神经组织结构清晰,神经元结构清晰,细胞膜完整存在,胞质均质染色,细胞核完整清晰;模型组神经组织结构可见破坏、疏松,神经元数目减少、结构破坏,可见肿胀的神经元,细胞核凝聚固缩、溶解,核仁消失、核膜消失,胞质染色变浅;治疗组可见组织结构破坏、疏松,神经元数目减少或肿胀,细胞核凝聚固缩、溶解,核仁消失、核膜消失,胞质染色变浅,但程度均较模型组明显减轻。结论:丁苯酞对脑缺血再灌注后损伤具有保护作用,且机制可能是通过P53/mTOR通路减少细胞自噬反应而发挥作用的。