高温灾害性气候是影响金针菇产量的一种主要的非生物胁迫,严重影响金针菇的优质高产,是导致金针菇等低温型食用菌产量和品质下降的重要因素。随着“温室效应”的愈演愈烈,全球气候变暖已经成为金针菇生产体系所面临的严峻挑战。对于缓解热胁迫的研究具有两方面的意义:其一,有助于了解科学本质;其二,有助于生产实践。然而,目前针对食用菌耐热研究比较少,仅在双孢蘑菇、平菇中有所报道,对于金针菇的研究更是少之又少。综上所述,针对缓解金针菇热胁迫与相关机制的研究十分迫切,对这一问题的解决不仅可以减少能源的消耗,节约大量资金,还能保护环境,建设生态文明。本实验通过检测热胁迫后生物量、金针菇活力、菌丝球形态、菌丝胞内硫代巴比妥酸反应物(TBARS)积累、胞内过氧化氢(H2O2)含量以及相关抗氧化酶活性来判定热胁迫伤害程度,并通过添加一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)后看对热胁迫的缓解效果,最后初步探讨NO对金针菇热胁迫的缓解机制。主要研究结果如下:(1)研究热胁迫对金针菇造成的伤害结果显示,37℃热胁迫会对金针菇生物量产生严重影响,随着热激时间的延长,生物量逐渐下降,热激4 h后生物量下降了 22%,热激6 h后生物量下降了 38%,热激12 h生物量下降了 50%,热激24 h生物量下降了 66%左右。热胁迫对金针菇伤害的另一个表现形式是菌种活力的下降。在液体培养时,正常温度条件下金针菇菌丝球菌丝茂密、发射状生长,在遭遇热胁迫时,随着时间的延长,其菌丝开始弯曲,逐渐蜷缩一团,甚至断裂。生理指标检测发现,随着热胁迫的延续,菌丝体内TBARS的含量会持续积累,体内H2O2含量显著上升,相关抗氧化酶活性显著变化。(2)外源添加NO供体SNP预处理与未进行SNP预处理的金针菇菌丝相比,SNP预处理过的菌丝生物量下降趋势有了明显的缓解,菌丝活力下降趋势得到了缓解,菌丝对热的耐受能力提高,菌丝蜷曲程度有所缓解,菌丝细胞内TBARS以及H2O2含量水平降低,胞内的相关抗氧化酶活性也有了大幅度的上升。但是添加充分曝光后无法释放NO的SNP(E-SNP)则没有缓解效果,这说明NO能够缓解金针菇热胁迫。(3)探讨NO对金针菇热胁迫的缓解机制发现,外源NO通过清除金针菇菌丝胞内ROS的过多积累来缓解热胁迫,研究发现外源添加NO和NAC处理能够显著降低胞内ROS水平,并在生物量、菌丝活力和TBARS积累水平上缓解热胁迫。进一步研究发现,外源NO对于金针菇热胁迫的缓解是依赖于钙离子,当用EGTA螯合胞外钙离子使其不能内流时发现SNP对于金针菇热胁迫的缓解效果消失。