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宫颈癌是临床常见的女性癌症之一,对患者的健康造成严重的威胁。其中,复发、转移、扩散等问题是导致患者死亡的主要原因。目前,宫颈癌的治疗方式主要以手术和放疗为主。虽然,大部分早期患者可以治愈,但由于其发病机制尚不明确,对于晚期和复发的患者尚无满意的治疗方法。因此,急需寻找更好的靶向治疗手段来挽救患者的生命。微小核糖核酸（micro RNA,mi RNA）在调节细胞增殖、分化、凋亡等功能中起到至关重要的作用,与恶性肿瘤的形成密切相关。已有研究证明mi RNAs在宫颈癌中出现异常表达,并通过靶向调控其下游蛋白影响宫颈癌的进展,可作为诊断宫颈癌的潜在生物标志物。研究表明,mi R-424-5p参与多种肿瘤的增殖、侵袭和转移过程。而关于mi R-424-5p在宫颈癌发生发展中的作用及机制,迄今为止少有报道。新型雌激素受体G蛋白偶联受体30（G protein-coupled receptor 30,GPR30）,是一种新型雌激素膜受体。一方面,GPR30可以与雌激素特异性结合,启动丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、磷脂酰肌醇-3激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）等信号通路促进肿瘤进展。另一方面,它通过调控表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）促使血管形成,促进肿瘤侵袭和转移。本课题组前期的研究表明GPR30在宫颈癌中高表达,那么,GPR30影响宫颈癌恶性生物学行为的发病机制中,是否有mi R-424-5p的参与?mi R-424-5p是否通过靶向GPR30促进宫颈癌的发生发展?其具体作用机制如何?有待做进一步研究进行证实。为此,本研究通过过表达mi R-424-5p或抑制mi R-424-5p表达,探究mi R-424-5p对宫颈癌He La细胞恶性生物学行为的影响,并研究mi R-424-5p与GPR30的靶向关系,探讨其作用机制。旨在进一步寻找新的靶基因和调控机制,为宫颈癌的基因治疗提供潜在的理论依据。本研究将宫颈癌He La细胞分为:NC mimics组（转染mi R-424-5p模拟物阴性对照）、mimics组（转染mi R-424-5p模拟物）、NC inhibitor组（转染mi R-424-5p抑制物阴性对照）、inhibitor组（转染mi R-424-5p抑制物）,采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR）检测转染效果;倒置显微镜和扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）观察转染后宫颈癌细胞形态学变化;细胞增殖-毒性检测（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法检测宫颈癌细胞的增殖情况;使用平板克隆形成实验来检测克隆形成的能力;Transwell小室测定细胞的侵袭能力;细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移率;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;采用生物信息学软件预测mi R-424-5p的靶基因,双荧光素酶实验初步验证mi R-424-5p与GPR30的靶向关系;使用q RT-PCR和免疫蛋白印迹（Western blot,WB）再次确定mi R-424-5p和GPR30的靶关系;WB实验检测PI3K/蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）/西罗莫司靶蛋白（mechanistic target of rapamycin,m TOR）信号转导通路相关蛋白的表达。研究发现,过表达mi R-424-5p会导致He La细胞数量减少,细胞表面的微绒毛和伪足减少;mimics组中He La细胞增殖、克隆、侵袭、迁移能力显著低于NC mimics组,而inhibitor组明显高于NC inhibitor组;mimics组G0/G1期细胞比例明显高于NC mimics组,S期和G2/M期细胞比例显著低于NC mimics组,而inhibitor组则出现相反的结果;与NC mimics组相比,mimics组中He La细胞凋亡率显著增多,而inhibitor组细胞凋亡率明显低于NC inhibitor组。靶基因预测及双荧光素酶实验证实GPR30是mi R-424-5p的直接靶基因;宫颈癌组织中mi R-424-5p表达量显著低于正常宫颈组织,而GPR30的表达量显著高于正常宫颈组织。mimics组中GPR30、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B,p-AKT）/AKT、磷酸化西罗莫司靶蛋白（phosphorylated mechanistic target of rapamycin,p-m TOR）/m TOR的表达量显著低于NC mimics组,而inhibitor组明显高于NC inhibitor组,以上指标差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。综上所述,mi R-424-5p的低表达可能促进宫颈癌的进展,而过表达mi R-424-5p可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、克隆、侵袭、迁移和细胞周期的进展,并诱导细胞凋亡。mi R-424-5p可能通过GPR30/PI3K/AKT/m TOR轴影响宫颈癌的恶性生物学行为,可能成为宫颈癌基因治疗的潜在靶点。