宫颈癌（Cervical cancer,CC）目前已经成为了女性同胞因疾病致死的前几位。该病现阶段在临床上取得了较好的治疗效果,过去十年其病死率呈现一定下降趋势,但一些难治性宫颈癌及晚期患者对放化疗敏感性较低,导致疾病复发及转移,对女性生命安全健康构成严重威胁。微小RNA是内源性的,以单拷贝及多拷贝的形式存在。近年来,多种短链RNA被发现对宫颈癌细胞的存活、生长、增殖以及侵袭转移等多种生物学活性具有调控能力。因而,进行广泛深入的微小RNA作用于宫颈癌的分子生物学研究,可对宫颈恶性肿瘤的基因靶向治疗提供新的切入点。近年来大量研究中显示miR-195在肿瘤中的作用特征十分显著,被发现在多种恶性肿瘤的病理进程中具有较深的影响,其与诸多癌症细胞的各种生物学活性有着密不可分的联系。核糖体蛋白激酶6（ribosomal protein s6 kinases,S6Ks）是雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,m TOR）基因下游靶蛋白。m TOR可使S6K1和4E-BP1磷酸化,从而发挥其功能。在相关实验中发现,在机体因多种因素所致的S6K1,S6K2s基因缺失后,可观察到细胞凋亡量增多。本课题探索了miR-195与S6K1之间的作用关系,并进一步发现二者协同作用于宫颈恶性肿瘤。为临床研究提供基础。本研究选用20个CC患者的CC标本和正常组织。PCR检测组织内部miR-195的m RNA表达;选用Hela细胞,原代培养,选取其第三代进行研究。构建miR-195 mimics,miR-195 inhibitor,共同转染到Hela细胞内,之后进行细胞的功能实验:本研究首先采用RT-PCR测定转染后miR-195的表达。转染成功后本研究再确定miR-195与S6K1的靶向关系。采用Western-blot检测每组Hela细胞中S6K1的表达量,再次确定了二者之间的靶关系。CCK8实验检测各组细胞增长率。划痕实验检测各组细胞的迁移率。TUNEL实验检测了各组细胞凋亡。Transwell检测各组Hela细胞的侵袭力。FCM检测Hela凋亡数及G1/S/G2期的细胞占比。研究结果示,检测到miR-195在CC组织里低表达,而在癌周围组织里高表达,P<0.01。转染后的各分组细胞,miR-195mimics组目的基因的表达变高,miR-195inhibitor组目的基因表达与未处理组相比有所降低,P值<0.05。miR-195 m RNA 3’非编码区预测到一个S6K1结合位点,并对该位点进行了验证。miR-195在Hela细胞内过表达后,S6K1的蛋白浓度表达较对照组降低,表达量为0.724±0.05（P<0.05）,而miR-195的部分沉默则可以有效的促进S6K1蛋白的表达,P<0.01。CCK-8检测细胞活力结果显示,当miR-195在细胞内过表达后,细胞的活力明显降低,而miR-195的敲除可明显的提升细胞的增殖趋势,P<0.05。TUNEL以及FCM结果显示,miR-195mimics组宫颈癌细胞的成活率降低,miR-195inhibitor组细胞的成活率有所提升,P<0.01。FCM示miR-195mimics组有接近70%G1期细胞,而miR-195inhibitor组G1的Hela仅不到50%,P<0.05。Scratch结果示,miR-195mimics组一字横线向中间缩窄较慢,而miR-195inhibitor组向中间缩窄较快,P<0.01。癌细胞穿透实验结果示,上调组小室底部的Hela数约占control组约1/8,下调组底部的Hela数约3倍高于control组。综上所述,在宫颈癌病理发展过程中,miR-195体现出抑癌性,S6K1体现出促癌性特点。提高miR-195的表达后,S6K1的表达有所减少,而当miR-195基因沉默后,宫颈癌细胞的活性及迁徙增殖的能力有所提升。我们可以推断S6K1可以作为miR-195的靶点体现其对Hela各种生物学行为的调节。这对于宫颈癌的靶基因治疗具有一定的启发性。