论文部分内容阅读
玉米芯含有丰富的膳食纤维,经水解可获得可溶性膳食纤维-果胶(Soluble dietary fibre-pectin,SDF-P),它可促进动物和人的胃肠运动。本研究试图建立玉米芯SDF-P理想的制备条件,高效提取其SDF-P;以此为对象,研究SDF-P增进肠肌运动的受体学机理,为研发膳食纤维营养补充剂提供理论依据。本文主要结果如下:1二步法玉米芯果胶制备工艺:比较了 5种前处理试剂的作用效果,其中NaOH稀溶液具有理想的降解玉米芯纤维的作用。经优化,其适宜工作条件是2%NaOH、1:27料液比、650w×40s微波。后处理采用酸性纤维素酶(Cellulase)进行工艺优化,其适宜工作条件为0.4%纤维素酶、1:15料液比和750w×50s微波。采用二步法提取玉米芯果胶,其总得率可达到15%,极显著高于酶解法和酸解法(p<0.01),它半乳糖醛酸含量 36.58%±3.6%(p<0.05)。2玉米芯果胶增进肠蠕动:研究表明玉米芯SDF-P增进肠蠕动的作用机制类似乙酰胆碱(Ach),在离体肠段内1.0%SDF-P即有效增进离体肠段肠肌收缩频率(p<0.01),有利于肠段自身血液循环并保持有效的生理功能,从而改善了肠健康。3玉米芯果胶促进Ca2+内流:研究发现适量SDF-P(300μg/ml和500μg/ml)作用于Caco-2和DLD-1细胞,导致细胞Ca离子通道打开,胞外Ca2+内流和细胞器Ca2+外溢,使Caco-2和DLD-1细胞内[Ca2+]从基础对照的18.7、6.1升高到51.9、8.5,初步证实SDF-P在肠道内具有类Ach作用或机械性刺激作用,引导肠壁机械性和化学性受体响应,导致肠细胞收缩。4玉米芯果胶对Ach-M2受体的影响:Ach-M2受体存在于消化道上皮细胞和平滑肌细胞,它在酸(H+)、机械和激动剂(Ach)作用下,受体蛋白变构,产生兴奋收缩偶联,增强肠肌运动。本研究以DLD-1细胞为对象,观测膜Ach-M2受体变化。发现给予300μg/mlSDF-P,即可导致DLD-1细胞膜上Ach-M2受体内吞并向核周集聚,具有类似Ach作用。综上所述,2%NaOH联合cellulase二步法提取玉米芯SDF-P效果显著,且极显著优于酸解法和酶解法。玉米芯SDF-P增加肠蠕动的作用类似Ach,它引起离体肠段收缩频率明显增加(p<0.01)。究其机理,SDF-P作用于细胞膜Ach-M2受体,导致受体蛋白变构,Ca离子通道打开,引起胞内[Ca2+]增高,是平滑肌收缩增强的基础。