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目的观察雷帕霉素诱导结肠癌SW480细胞自噬后对细胞侵袭、迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法1.MDC染色免疫荧光观察自噬泡。2.流式细胞术定量检测自噬水平和细胞内活性氧水平。3.透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构。4.免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3水平。5.应用Boyden小室、划痕实验观察自噬对SW480细胞侵袭能力、迁移能力的影响。6.RT-PCR检测SW480细胞中自噬及凋亡相关基因Beclin1和Bcl-2的表达。7.免疫组织化学法观察组织中Beclin1、Bcl-2和Caspase3蛋白的表达。结果1.雷帕霉素诱导后结肠癌SW480细胞发生自噬,且自噬水平随处理时间的延长而升高(P<0.05)。2.雷帕霉素处理组SW480细胞侵袭力增强(P<0.01),迁移力增加(P<0.05)。3.雷帕霉素处理组细胞内活性氧水平增高,活性氧清除剂NAC可抑制自噬的发生。4.雷帕霉素处理组Beclin1和Bcl-2的表达均高于对照组(P<0.05)。5. Beclin1在结直肠癌癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织的阳性表达率分别为11.76%、21.05%和68.92%,差异有统计学意义(P<0.01); Bcl-2在结直肠癌癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织的阳性表达率分别为5.88%、15.79%和63.51%,差异有统计学意义(P<0.01)；Caspase3在结直肠癌癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织的阳性表达率分别为94.12%、73.68%和58.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。 Spearman等级相关分析表明Beclin1的表达和Bcl-2的农达呈正相关(rs,=0.583, P<0.01), Beclin1和Caspase3在结直肠癌组织中的表达呈负相关(rs=-0.511, P<0.0l), Bcl-2的表达和Caspase3的表达呈负相关(rs=-0.530,P<0.01)。6.在结直肠腺癌组织中,Beclin1的表达与肿瘤的淋巴结转移、分化程度及Dukes分期有关(P<0.05); Bcl-2的农达与肿瘤的分化程度和Duke’s分期有关(P<0.05); Caspase3的表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05)。结论1.雷帕霉素可诱导结肠癌SW480细胞发生自噬,且随着自噬水平的升高,细胞侵袭能力增强,迁移能力增加,提示自噬对细胞起保护作用。2.雷帕霉素可以引起胞内活性氧水平的升高,而活性氧清除剂可抑制自噬发生,提示雷帕霉素可通过引起胞内活性氧升高来诱导自噬。3.Beclin1、 Bcl-2和Caspase3在结直肠癌癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织中的表达情况提示：自噬相关蛋白Beclin1和凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3共同参与到结直肠癌的发生、发展中,自噬活性逐渐升高,凋亡能力越来越弱,肿瘤细胞逃逸凋亡的能力越来越强。4. Beclin1、Bcl-2和Caspase3蛋白表达与肿瘤的分化程度有关,Beclin1的表达与肿瘤淋巴结转移和Dukes分期有关,提示三者的检测可能有助于了解和判断肿瘤患者病程的进展。