红肉猕猴桃是猕猴桃品种的新类型,甜度高,综合品质好,具有巨大的商业价值。红阳是第一个商业化的红肉猕猴桃品种,但在不同地区栽培时果肉着色表现不稳定,在武汉等高温地区栽培时着色很浅。前人研究表明,“红阳”猕猴桃呈现红色是由于内果皮含有矢车菊素等花青素物质。为阐明“红阳”猕猴桃呈色的分子机理,本研究初步分离了“红阳”花青素代谢途径中游的二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)基因cDNA序列,并分析了其表达特点。主要方法及结果如下:　　 利用葡萄(Vitisvinfera)果实的DFR-cDNA序列搜索猕猴桃(ActinidiaLindl.)EST数据库,拼接所有与该cDNA相似片段成contig并基于此设计特异引物,PCR扩增“红阳”内果皮组织中DFR的两个DFR片段(AcDFR1和AcDFR2)。在此基础上利用5’-RACE和3-RACE技术,分别克隆到具有完整阅读框的AcDFR1(1264bp)和靠近3’端的部分AcDFR2序列(880bp)。AcDFR1与茶DFR-cDNA(Camelliasinensis)相似达84％,且AcDFR1与非洲菊变种(Gerberahybridavar.regina)的氨基酸序列相似达80％。实时定量PCR分析表明,AcDFR1在绿肉猕猴桃品种“金魁”(A.chinensisvar.deliciosa‘Jinkui’)中表达很高,AcDFR1和AcDFR2在黄肉猕猴桃品种“金农”(A.chinensisvar.chinensis‘Jinnong’)与“红阳”(A.chinensisvar.chinensis‘Hongyang’)中较低,且在果实发育后期(大约花后90至120d)均有所升高,二者可能均参与了红肉猕猴桃中花青素的积累,而在绿肉猕猴桃“金魁”与黄肉猕猴桃“金农”中,AeDFR1可能还参与了类黄酮代谢过程中的上游分支途径。