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苯环化合物是指含有一个或更多苯环的分子,它们多以无色、白色或者浅黄色的低溶解度固体形式存在于环境中,具有高熔点,高沸点和低蒸汽压的特点。它们普遍存在于有毒的,致癌和致突变的污染物中,在环境中不容易降解,由于处于生态中的各个环节中,因而容易被积累。微生物降解是一种低成本,高效率,无二次污染,易操作的方法。因此,分离筛选高效的苯环化合物降解菌,研究其降解特性和相关降解酶,并将其应用于污染治理中具有重要的理论和实际意义。本研究应用微生物富集培养的方法从湖北某化工厂的活性污泥中,分离筛选得到两株具有高效苯环化合物降解效率的菌株,M7和M8对其降解特性和降解机理进行研究,并将其应用到工业废水和生活污水的处理中。通过形态学、生理生化和16S rDNA序列同源性分析,将菌株M7和M8分别鉴定为不动杆菌属和苍白杆菌属。M7对卡那霉素,庆大霉素和链霉素比较敏感,而M8对氨苄青霉素,卡那霉素,四环素,庆大霉素,链霉素,壮观霉素等七种抗生素都有抗性。在如今抗生素滥用的情况下,菌株M8在含抗生素的污水中的更具有应用潜力。菌株M7,M8均不能利用糖类作为碳源生长或者发酵,但能够利用多种苯环化合物作为唯一碳源生长,两株菌株底物的广谱性说明在处理环境中复杂的苯环化合物污染中有巨大的潜力。菌株M7和M8的最适降解条件为:pH7.0,温度30℃,转速200r/min,接种量5%(V/V)。在最适条件下考察菌株的降解能力,M7在48h后对500mg/L对苯酚的降解率达到99%以上,对500mg/L的萘的降解率达到了80%,8天后对500mg/L的吡啶的降解率达到了61.2%。外加碳源对萘降解率具有明显作用,间苯二酚和蛋白胨促进菌株M7对萘的降解,而草酸铵,邻苯三酚,间苯二酚,酵母粉,蛋白胨,水杨酸等外加碳源普遍都能增大M8对萘的降解率。最后将降解菌运用于焦化废水,酒厂废水和猪粪水的降解中,菌株M7对这三种废水的降解率分别为39.61%、83.68%、95.64%,而M8的降解率分别为21.43%、75.00%、72.38%。经过72h菌株M7和M8处理后的焦化废水和酒厂废水COD接近于国家对污水排放的三级排放标准,而猪粪水的COD已达到国家对污水排放的二级排放标准,接近一级排放标准,酒厂废水的TN也达到一级排放标准。此外,在对酒厂废水的处理中发现,降解菌对总磷(TP)的去除相当显著,在36h时便均能达到80%以上。邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(CatA),邻苯二酚2,3-双加氧酶基因(nahH),萘双加氧酶基因(nahAc)是苯环化合物降解途径中的关键酶基因。根据已报道的基因序列,合成特异性引物,在降解菌M7中克隆得到邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,在M8中克隆了邻苯二酚1,2-双加氧酶基因,而将这两条序列在NCBI的核苷酸数据库中Blast比较分析发现,克隆的序列与假单胞菌属的双加氧酶基因的同源性达到了99%。在这两株菌中都能克隆得到萘双加氧酶基因(nahAc)。将萘降解过程的产物经过GC-MS分析的结果与降解菌克隆的双加氧酶基因结果相结合,初步推论M7在萘降解过程中采取的是邻苯二酚间位降解途径,M8的萘降解途径为邻苯二酚邻位降解途径。