一株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及基因组分析

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鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus CAV)引起的以鸡的贫血和免疫抑制为主要特征的传染病。该病是危害养禽业的重要传染病。鸡是CAV的唯一宿主,雏鸡感染CAV后的典型病理变化是:贫血、骨髓脂肪化、胸腺萎缩等组织学损伤。本研究对湖北省某个感染CAV的养鸡场进行了病毒的分离鉴定和病毒基因组的测序及分析。
  将病料匀浆上清液接种于鸡胚,可引起胚体发育迟缓,取胚体组织通过PCR分析进一步确定了该鸡群感染了CAV。本实验成功分离出1株CAV,命名为XH-16。该毒株可导致雏鸡精神沉郁、呆立、不愿走动、发育迟缓及翅膀渗出性出血等症状,部分雏鸡发生死亡,致死率可达到51%;剖检病鸡可见胸腺萎缩出血,股骨骨髓萎缩呈现粉红色或暗红色,肝脏肿大褪色呈黄色等;病理组织学观察发现,胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官中的淋巴细胞发生变性、坏死且淋巴细胞数量减少,从而导致机体出现免疫抑制;骨髓中造血干细胞数量严重减少,出现贫血。
  进一步对病鸡的各组织分别进行PCR检测,结果表明试验组鸡的胸腺、法氏囊、股骨骨髓、肝脏、脾脏、肾脏和心脏中均含毒。此外,通过对比两种不同的从组织中提取病毒的方法,发现用细胞核裂解法提取到的病毒损失量较小,此方法可较好的提取到病毒。
  分离株XH-16基因组全长为2298bp。将分离株XH-16的基因组,与GenBank中已发表的国内外具有代表性的35株CAV毒株的基因组进行对比。结果显示在这36株CAV分离株中,XH-16与分离株KY888890.1China有较近的亲缘进化关系。对这36株CAV毒株的VP1、VP2和VP3蛋白的氨基酸序列分别进行比对分析。结果显示,XH-16的VP1、VP2和VP3蛋白的氨基酸序列相对保守,与多株病毒株的氨基酸序列有完全一致的情况。分离株XH-16的VP1蛋白的第394位氨基酸为谷氨酰胺(Q),这表明分离株XH-16为高致病性毒株。
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