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干扰素刺激因子Viperin定位在细胞内质网和脂滴中，正常表达水平较低，在多种细胞中可被干扰素、脂多糖、poly(I∶C)和多种病毒等诱导表达，可以在机体抵抗病原过程中发挥重要作用。目前Viperin基因的抗炎和抗病毒作用主要集中在人类疾病的研究，有关猪Viperin基因的作用研究较少。本研究将构建的猪Viperin基因真核表达载体PB-Viperin转染PK15细胞，分别利用荧光显微镜观察、RT-PCR和Western blot方法，筛选建立Viperin基因过表达PK15细胞系;为了探讨猪Viperin的抗炎作用，以LPS处理PK15细胞为炎性反应细胞模型，采用RT-PCR和Western blot方法检测TLR4/NF-κB、JAK/STAT信号通路关键基因mRNA和蛋白水平的表达，评价过表达猪Viperin基因在细胞水平的抗炎作用;进一步对猪Viperin基因的抗病毒作用进行了初步研究，以CSFV感染Viperin过表达的PK15细胞为研究对象，从病毒滴度检测、免疫荧光观察法和Western blot蛋白水平检测评价猪Viperin基因对CSFV复制的影响，利用RT-PCR和Western blot方法检测IRF3和STAT1表达，初步揭示猪Viperin基因抗CSFV的分子机制。结果如下: 猪Viperin基因过表达细胞系构建:荧光显微镜观察结果显示，PB-Viperin和PB空载转染PK15细胞均发出绿色荧光，说明载体成功转染PK15细胞;RT-PCR和Western blot结果显示，与PB空载转染组相比，PB-Viperin转染组细胞中Viperin mRNA和蛋白表达显著性升高，表明猪Viperin基因在PK15细胞中实现了过表达，经嘌呤霉素筛选获得了稳定过表达Viperin基因的PK15细胞系。 猪Viperin基因的抗炎作用:LPS提高了TLR4、JAK/STAT通路关键基因表达水平，即LPS激活了TLR4和JAK/STAT信号通路。RT-PCR结果显示:PK-PBV细胞相较于PK-PB细胞的IL-6mRNA表达下降，Viperin mRNA表达上调，且差异显著。对照组中MyD88、TBK1、NF-κB、IRF3和IFNα等基因mRNA表达在PK-PB和PK-PBV中无明显差异;LPS处理后，过表达Viperin能不同程度地下调TLR4信号通路关键因子MyD88、TBK1、NF-κB、IRF3和IFNα等基因mRNA的表达，且TBK1、NF-κB和IFNα的mRNA表达下降差异显著。提示Viperin可能通过TLR4信号通路抑制细胞炎性反应。LPS能提高PK-PB和PK-PBV中的STAT1mRNA和蛋白表达水平，与PK-PB相比，LPS组PK-PBV中的STAT1mRNA和蛋白表达水平降低，Viperin mRNA和蛋白表达水平也发生了下调。提示过表达Viperin能降低LPS升高的STAT1mRNA和蛋白表达水平。AG490抑制JAK-STAT通路后，STAT1蛋白表达水平显著下降，而Viperin蛋白表达水平显著上升。与LPS组相比，L+A组的STAT1mRNA和蛋白表达水平降低，而Viperin mRNA和蛋白表达水平升高;与PK-PB细胞相比，PK-PBV中STAT1mRNA和蛋白表达水平显著降低;Viperin mRNA和蛋白表达水平显著升高。提示Viperin可能通过调节TLR4/JAK/STAT通路发挥抗炎作用。 猪Viperin基因的抗病毒作用:与PK-PB细胞相比，CSFV感染后病毒滴度明显下降，下降幅度与CSFV的处理时间及感染复数有关。CSFV感染后E2蛋白表达显著升高，与PK-PB细胞相比，CSFV感染后PK-PBV细胞中E2蛋白明显减少。提示Viperin过表达能抑制CSFV E2蛋白表达，说明Viperin能抑制CSFV复制。CSFV感染后PK-PBV细胞中IRF3和STAT1的mRNA表达上调，阻断STAT信号后，PK-PBV细胞中IRF3和STAT1mRNA表达上调。提示猪Viperin抑制复制可能通过JAK/STAT通路调控IRF3的表达进行。