灭多威诱导MDEC-07114细胞凋亡的实验研究

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:milamiya2009
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目的:利用灭多威作用于家蝇胚胎细胞系(MDEC-07114),探讨灭多威诱导MDEC-07114细胞凋亡及机制。方法:1、实验分组:不同浓度灭多威组(1mg/ml组、2mg/ml组、4mg/ml组、8mg/ml组),同时设正常组、1%丙酮组;2、HE染色法观察MDEC-07114细胞凋亡形态,并测定细胞凋亡指数;3、TUNEL检测MDEC-07114细胞凋亡;4、透射电镜观察不同浓度灭多威作用后MDEC-07114细胞的超微结构变化;5、罗丹明标记处理MDEC-07114细胞,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化。结果:1、不同浓度灭多威作用于MDEC-07114后,从2mg/ml组开始见典型凋亡细胞,细胞凋亡指数增加,且随浓度的递增而逐渐升高;2、TUNEL检测:2mg/ml组出现明显的绿色荧光,4mg/ml组有所增加,8mg/ml荧光最强;3、透射电镜观察:1mg/ml组开始出现核染色质浓缩、边集。从2mg/ml组开始出现典型凋亡细胞形态,有大量的细胞核染色质浓缩、边集,胞浆内出现空泡,有线粒体肿胀、空化;4、流式细胞仪检测:2mg/ml灭多威作用于细胞后1h,荧光强度开始减弱,荧光峰左移,线粒体膜电位下降,随着药物作用时间的延长,线粒体膜电位逐渐下降,且呈时间依赖性。结论:1、灭多威可诱导MDEC-07114细胞凋亡;2、灭多威诱导MDEC-07114细胞凋亡过程中,可能有线粒体途径参与。
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