【摘 要】
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埃及伊蚊(Aedes aegypti)是虫媒病的主要传播媒介之一,雌蚊通过吸血传播登革热病毒、基孔肯亚病毒、寨卡病毒和黄热病病毒等多种病毒,严重危害人类的健康。目前蚊虫防控主要包括环境防控、物理防控、化学防控和生物防控等方法,其中又主要依赖化学防控。化学防控具有高效、简单、广谱等优点,常见的有拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类、有机磷、有机氯、大环内酯类等杀虫剂,但随着杀虫剂的大量及不合理的使用导致了严重
【基金项目】
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国家自然科学基金(31472186,31860702); 海南省重点研发计划项目(DZYF2019073)
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埃及伊蚊(Aedes aegypti)是虫媒病的主要传播媒介之一,雌蚊通过吸血传播登革热病毒、基孔肯亚病毒、寨卡病毒和黄热病病毒等多种病毒,严重危害人类的健康。目前蚊虫防控主要包括环境防控、物理防控、化学防控和生物防控等方法,其中又主要依赖化学防控。化学防控具有高效、简单、广谱等优点,常见的有拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类、有机磷、有机氯、大环内酯类等杀虫剂,但随着杀虫剂的大量及不合理的使用导致了严重的杀虫剂抗性产生,探索新型杀虫剂对蚊虫防控效果,对蚊虫防控具有重要意义。天维菌素(Tenvermectin,TVM)是一种新型十六元大环内酯类杀虫剂,有研究表明,天维菌素对小菜蛾、棉铃虫、朱砂叶螨、柑橘红蜘蛛等害虫均有较高的杀虫杀螨活性。为了解天维菌素对埃及伊蚊的毒力作用、繁殖影响、毒理机制以及埃及伊蚊潜在的抗药性相关基因,进行了以下的相关研究:天维菌素对蚊虫的毒力作用利用天维菌素对埃及伊蚊、白纹伊蚊(Ae.albopictus)、致卷库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)的幼虫进行生物测定,了解其对蚊虫的作用效果。天维菌素处理三种蚊虫幼虫24h后,得到天维菌素对埃及伊蚊、白纹伊蚊、致卷库蚊幼虫的LC50值分别为2.181、0.589和0.139 mg/L。用含有不同浓度天维菌素的糖水饲喂埃及伊蚊成蚊24h,统计一周内的生存情况,第七天,对照组和0.1、1、2、5、10ppm组的存活率分别为93.33%、80.00%、66.67%、23.33%、3.33%和3.33%。结果表明天维菌素对蚊虫具有较好的杀虫活性。天维菌素对埃及伊蚊雌蚊繁殖的影响用注射了不同浓度天维菌素的小鼠饲喂交配后的埃及伊蚊雌蚊,三天后放入卵纸待其产卵,统计产卵量和孵化数。与对照组相比,0.5和1mg/kg组的产卵量与孵化率均显著下降,三者平均产卵量分别为91.65、40.17和38.54,孵化率分别为78.65%、40.60%和34.92%。结果表明天维菌素会降低埃及伊蚊的生殖能力。天维菌素处理埃及伊蚊幼虫的转录组学分析天维菌素处理埃及伊蚊幼虫24h后,提取幼虫RNA进行转录组测序,结果显示,与对照组相比,天维菌素处理后埃及伊蚊幼虫中有2647个基因差异显著表达,其中上调基因有697个,下调表达的基因有1950个。Gene Ontology分析显示,差异基因主要注释到细胞过程、代谢过程、膜、结合和催化活性等功能类。KEGG通路主要富集在药物代谢、免疫应答、生物合成以及消化与吸收等过程。选取GST-1、EST2等6个目标基因进行q PCR验证,表达水平与测序结果一致。埃及伊蚊对天维菌素抗性相关基因的研究利用RNAi技术对GST-1、Glu Cl进行干扰,用表达目的基因ds RNA的菌体饲喂埃及伊蚊幼虫,结果显示,与对照组相比,饲喂菌体的幼虫体内GST-1、Glu Cl相对表达量分别下降了65.48%和39.88%。然后对干扰后的幼虫进行生物测定,干扰GST-1的幼虫的LC50值为1.292mg/L,增强了埃及伊蚊对天维菌素的敏感性;干扰Glu Cl的幼虫的LC50值为2.371mg/L,与对照相比无明显差异。本研究表明天维菌素对蚊虫具有较好的杀虫活性,天维菌素血餐会影响埃及伊蚊雌蚊的繁殖能力,初步证实GST-1的干扰会增强天维菌素对埃及伊蚊幼虫的作用。本研究为蚊媒防治提供一定的参考,也为进一步探究埃及伊蚊中天维菌素的毒理机制以及埃及伊蚊潜在的抗药性相关基因奠定了基础。
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