镉是常见的环境和工业污染物,对雌性哺乳动物生殖系统具有明显的毒性。可引起卵巢病理组织学改变,干扰排卵和受精过程,引起暂时性不育,还可能对雌激素受体、孕酮受体及基因表达产生影响。 研究目的:探讨镉对卵巢颗粒细胞的凋亡诱导作用,阐明其作用机理;在理论上对镉的性腺毒性作用给予补充,为今后的研究提供理论依据。 研究方法:本实验采用25日龄未成年雌性小鼠为实验对象,通过孕马血清促性腺激素处理后再腹腔注射氯化镉的在体实验模型,采用病理学方法检测卵巢中卵泡闭锁的变化:用DNA ladder的有无及TUNEL法来检测卵巢颗粒细胞是否凋亡及凋亡率的变化;用免疫组化方法检测颗粒细胞bcl-2、bax基因的表达;用亚硒酸钠作为拮抗剂来探讨硒对镉毒性的拮抗作用。 实验结果:用琼脂糖凝胶电泳法未能检测到48h各组的DNA梯状带,96h仅高剂量组(4mg/kg·wb)有梯状带出现。TUNEL法检测结果为:48h对照组凋亡率为0.6378%;高、中、低剂量组分别为13.8871%、10.7573%、10.0208%;硒组为5.7232%。96h对照组凋亡率上升为11.0963%,高、中、低各组分别为20.3204%、12.2031%、12.2171%,硒组为14.9203%。表明各组均有不同程度的凋亡,且随镉剂量增加,凋亡率有上升趋势,差异有极显著性(P<0.01)。病理学检察卵巢切片中卵泡闭锁情况,结果随镉剂量的增加,卵泡闭锁率逐渐升高,差异有显著性。免疫组化法检测Bax和Bcl-2蛋白表达,结果Bax在各组普遍表达,并随镉剂量的加大而表达增强,实验组与对照组间差异极显著(P<0.01),48h与96h两时间段间无差异;Bcl-2则普遍表达较弱或不表达,各组间无显著性差异。 实验结论:1) 镉能促进小鼠卵巢颗粒细胞凋亡,并具有剂量效应关系。2) 镉能促进卵泡闭锁,使卵巢间质腺数量增加。3) 镉能增强颗粒细胞凋亡相关基因bax的表达,对bcl-2的表达则无明显影响。4) 硒具有一定的抑制镉致颗粒细胞凋亡的作用,但不能完全阻断。