秋葵品种资源遗传多样性研究及有效成分含量测定

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黄秋葵(AbelmoschusesculentusL.)为锦葵科秋葵属一年生草本植物,是一种菜、药、花兼用型的功能性植物。特别是近年来,随着黄秋葵的保健功效以及营养价值被人们逐渐发现,其推广种植面积正逐年增长,优良品种的选育也迫在眉睫。对秋葵种质资源遗传多样性以及分类的研究,有利于秋葵种质资源的收集、保存、鉴定、创新和综合利用。秋葵花中有效成分的提取及含量测定对于开发秋葵功能性产品也具有重要意义。本文对收集到的包括国内外的秋葵种质资源以及秋葵近缘野生种质在内的94份秋葵材料进行了形态学标记和ISSR、SRAP分子标记研究,以评价本实验秋葵种质资源的遗传多样性及亲缘关系,同时对所选出的部分黄秋葵花中的四种黄酮类物质进行了测定。结果如下:(1)对94份黄秋葵材料的形态学进行分析,在欧氏距离为9.36处,94份秋葵资源可以分为6大类群。11个晚熟品种聚为一类,红秋葵品种聚为一类。黄绿色品种聚为一类,近缘野生种单独聚类一类。(2)使用ISSR与SRAP两种方法对77份秋葵材料进行分子水平的研究,利用NTSYSPc-2.1软件对77份秋葵种质的ISSR及SRAP标记的结果进行统计分析,用非加权算术平均数聚类(UPGMA)法制作分子聚类的树状图。ISSR及SRAP标记分别在相似系数为0.82和0.83将所有秋葵材料聚为4个大类群和5个大类群。(3)将ISSR和SRAP标记统计数据合并后再一次进行聚类分析,77份秋葵种质的相似性系数在0.66-0.97之间,遗传相似性系数为0.83时,可以将所有供试材料分为6大类群。综合聚类结果与单个分子标记结果对比,多种分子标记的综合聚类更准确,更具有参考价值。(4)对比甲醇超声以及甲醇回流提取方法,结果表明超声提取方法要优越于回流提取方法。在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验对黄秋葵花黄酮提取工艺条件进行了优化研究。结果表明在甲醇提取时间为30min,提取浓度为70%、提取温度为40℃、提取次数为2次时,效果最优。(5)采用HPLC法建立了黄秋葵中4种黄酮类物质含量的测定方法,并对不同品种的黄秋葵花进行了含量测定与分析,为探索黄秋葵花中功效成分的分布规律以及筛选出功效成分含量高的黄秋葵品种提供了有力的依据。
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