重组人血管内皮抑素对兔VX-2移植瘤腘窝淋巴转移干预的实验研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangyong09
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目的:(1)观察重组人血管内皮抑素对兔VX-2移植瘤血管及淋巴管生成的影响,探讨其在兔移植瘤生长及腘窝淋巴结转移中的作用。(2)通过对兔VX-2肌肉移植瘤腘窝淋巴结组织中的新生血管进行微血管密度(MVD)计数及淋巴结铸型,观察淋巴结组织中微血管的形态及分布特点。方法:从南华大学实验动物部提取12只新西兰大白兔并在其右后小腿外侧肌肉内植入兔VX-2瘤组织块(1mm~3)建立兔VX-2肌肉移植瘤模型,1周后移植瘤长至直径约3mm大小,并随机分成两组,实验组用恩度0.75mg/Kg耳缘静脉注射抑制兔VX-2肌肉移植瘤生长,对照组用生理盐水耳缘静脉注射进行对照,均持续2周,移植术后每周行1次彩超检查测量瘤体大小及瘤体血供变化,描绘肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,用药完成1周后放血处死两组新西兰大白兔,取出两组移植瘤组织及腘窝淋巴结组织进行免疫组化实验,以CD31及LYVE-1分别标记两组瘤组织中微血管及微淋巴管并计数,以CD31标记两组淋巴结组织中微血管并计数,同时检测两组瘤组织中VEGF的表达情况。采用注射铸型剂ABS(红色)经淋巴结入门小动脉之供血动脉进行淋巴结血管铸型,同时应用淋巴管间接注射技术注射铸型剂ABS(蓝色)观察淋巴结充盈情况。铸型完成后将铸型标本进行腐蚀、修剪,冲洗、切片、干燥、导电等处理,最后扫描电镜下观察和摄相,激光共聚焦下三维重建。结果:(1)重组人血管内皮抑素对兔VX-2移植瘤腘窝淋巴结转移率有明显抑制作用(P<0.05);对兔VX-2移植瘤生长体积及瘤体血供也有明显的抑制作用(P<0.05),抑瘤率IR达到了26.22%-29.09%。(2)实验组兔VX-2移植瘤组织及腘窝淋巴结组织内MVD分别比对照组VX-2移植瘤组织及腘窝淋巴结组织内MVD低(P<0.05)。(3)实验组兔VX-2移植瘤组织中MLVD比对照组兔VX-2移植瘤组织中MLVD低(P<0.05)。(4)实验组兔VX-2移植瘤组织中VEGF阳性表达细胞百分数(20.59±3.59)低于对照组兔VX-2移植瘤组织中VEGF阳性表达细胞百分数(30.10±3.89),并有统计学意义(P<0.05)。(5)对照组VX-2移植瘤细胞VEGF阳性表达水平与兔VX-2移植瘤组织中MVD及MLVD呈正相关(r=0.89,P =0.000;r=0.79,P =0.001),与其腘窝淋巴结组织中MVD也呈正相关(r=0.87,P =0.001);实验组VX-2移植瘤细胞VEGF阳性表达水平与兔VX-2移植瘤组织中MVD及MLVD呈正相关(r=0.85,P =0.003;r=0.81,P =0.006),与其腘窝淋巴结组织中MVD也呈正相关(r=0.82,P =0.001)。结论:(1)重组人血管内皮抑素对兔VX-2移植瘤细胞VEGF表达、瘤组织MVD及MLVD水平有抑制作用。提示:重组人血管内皮抑素可抑制微血管和微淋巴管生成。(2)重组人血管内皮抑素能抑制兔VX-2移植瘤腘窝淋巴结转移,对淋巴结内MVD水平有抑制作用。
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