【摘 要】
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目的:研究罗格列酮对阿霉素(ADR)诱导的大鼠慢性肾损害时CyclinD1、CDK4及P27表达的影响,在细胞周期水平探讨罗格列酮对慢性肾脏病(chronickidney disease,CKD)时肾保护效应的可能机制。方法:2月龄雄性SD大鼠随机分为三组:A.空白对照组(对照组);B.ADR诱导肾损害组(ADR组);C.罗格列酮治疗组(RSG组)。B、C组经尾静脉注射阿霉素(6mg/kg)诱导慢
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目的:研究罗格列酮对阿霉素(ADR)诱导的大鼠慢性肾损害时CyclinD1、CDK4及P27表达的影响,在细胞周期水平探讨罗格列酮对慢性肾脏病(chronickidney disease,CKD)时肾保护效应的可能机制。
方法:2月龄雄性SD大鼠随机分为三组:A.空白对照组(对照组);B.ADR诱导肾损害组(ADR组);C.罗格列酮治疗组(RSG组)。B、C组经尾静脉注射阿霉素(6mg/kg)诱导慢性肾损害大鼠模型。造模2周后,RSG组大鼠予罗格列酮(4mg/kg)灌胃,模型组予蒸馏水灌胃,在实验第0d、14d和70d用磺基水杨酸比浊法测定尿蛋白量,实验第70d摘眼球法取血,测肝肾功能、电解质(K+、Na+)、随机血糖,并取大鼠肾组织,用10%福尔马林缓冲液固定,HE染色观察肾组织病理改变;免疫组织化学方法检测肾组织细胞周期正调控蛋白CyclinD1、CDK4及细胞周期负调控蛋白p27的表达并用LEICAQwin图像处理与分析系统测灰度值。
结果:
1.24小时尿蛋白定量结果分析
在第10周末测尿蛋白:RSG组(96.95±57.80mg/24h)、ADR组(140.93±26.06mg/24h)、对照组(6.49±1.1.84mg/24h),方差分析有统计学意义,两两之间q检验,ADR组与RSG组比较有统计学意义(P<0.01),对照组与其余两组比较有统计学意义(P<0.01)
2.血生化测定结果分析
RSG组大鼠血清白蛋白(25.57±3.35g/L)高于ADR组(19.38±2.45g/L)(p<0.01),但是血清甘油三酯(2.09±1.04mmol/L)和胆固醇(2.51±0.78 mmol/L)明显低于ADR组(4.31±1.35mmol/L,3.89±1.38mmol/L)(P<0.01,p<0.01)。各组间血清尿素氮、肌酐、血糖、电解质差异无统计学意义(p>0.05)。
3.肾组织病理改变
HE染色:光镜下可见ADR组大鼠肾小球肿胀,系膜增生,系膜细胞增多,系膜基质扩张;肾小管上皮细胞肿胀,肾小管管腔内可见蛋白管型,间质有炎性细胞浸润;RSG组大鼠肾小球肿胀、扩大,系膜基质扩张,球囊部分粘连等肾组织病变较ADR组明显减轻。
4.CyclinD1及CDK4表达水平分析各组灰度值分别为:RSG组(91.46±18.79;81.35±40.88)、ADR组(117.53±19.69;109.04±23.10)、对照组(26.20±6.57;22.8±4.57),方差分析有统计学意义,两两之间q检验,均有统计学意义(P<0.01)。
5.P27表达水平分析
各组灰度值分别为:RSG组(60.16±23.67)、ADR组(90.16±14.07)、对照组(37.57±8.93),方差分析有统计学意义,两两之间q检验,均有统计学意义(P<0.01)。
结论:
1.罗格列酮可以减少阿霉素诱导肾损害时大鼠24h尿蛋白量,增加血清ALB水平,降低血脂,改善肾脏组织病理学表现。
2.罗格列酮上调P27表达,下调CycinD1、CDK4表达并抑制肾脏系膜细胞及成纤维细胞的增殖可能是其肾保护效应的机制之一。
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