【摘 要】
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目的：探讨HBX、磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide-3-Kinase,PI3K)及其下游靶蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine Threonine Kinase,Akt)在涎腺腺样囊性癌(Adenoid Cystic Car
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目的：探讨HBX、磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide-3-Kinase,PI3K)及其下游靶蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine Threonine Kinase,Akt)在涎腺腺样囊性癌(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC)和重组涎腺腺样囊性癌(ACC-HBX)中的表达情况及HBX对PI3K/Akt信号通路的影响。材料与方法：利用转基因技术构建编码HBX基因的真核表达重组载体,建立转基因涎腺腺样囊性癌ACC-M/HBX细胞,通过细胞划痕、细胞培养和Western blot技术,探讨HBX对PI3K/Akt信号传导通路的影响。利用MEK/ERK抑制剂PD98059和表皮生长因子EGF处理涎腺腺腺样囊性癌ACC-M和ACC-M/HBX细胞,分别观测PD98059和EGF对ACC-M和ACC-M/HBX细胞生物学影响及HBX、PI3K及Akt的表达情况结果：1、HBX基因通过电转染技术瞬时转染率达到73.16%,利用G418进行筛选,无法得到稳定转染细胞系,检测结果通过瞬时转染重组细胞进行。2、在ACC-M细胞中PI3K和Akt存在表达,无HBX表达。在重组ACC-M/HBX细胞中有HBX蛋白表达,但PI3K和Akt无明显表达。用MEK/ERK信号传导通路抑制剂PD98059处理ACC-M/HBX后,PI3K和Akt含量与ACC-M细胞中PI3K/Akt含量相当。3、细胞划痕实验中ACC-M细胞愈合率高于ACC-M/HBX细胞,有统计学差异。结论：1.HBX可能对PI3K/Akt信号传导通路产生抑制作用。2.MEK/ERK信号传导通路是HBX影响PI3K/Akt信号通路的重要通路。3.表皮生长因子EGF对ACC-M/HBX细胞的生物学活性无明显影响,PD98059能降低ACC-M/HBX细胞的生物活性。
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