大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）是引起棉花黄萎病（Verticillium wilt）的致病菌，其防治难度极大，目前尚无有效防治该病害的手段。已有研究证实大丽轮枝菌分泌的毒蛋白是引起棉花黄萎、落叶、植株死亡和减产的主要因素。但是黄萎病中具有诸多种类的分泌毒性蛋白，较难找到单一种类的分泌毒性蛋白作为有效的防治突破点。现有研究表明分泌系统蛋白可调控诸多蛋白的分泌，据此可以从分泌系统蛋白的角度另辟蹊径，找到新的防治黄萎病的生物学靶点。本研究对棉花黄萎病菌中的分泌系统蛋白P型ATP酶（P-type ATPase，VdATPase，蛋白编号为VDAG₀1765）的编码基因的功能进行了分析。利用基因敲除技术构建了VdATPase基因缺失的大丽轮枝菌突变体VdATPase菌株。对突变体VdATPase菌株的生长速率、产孢量进行测试，并研究其分泌蛋白产物对棉株叶片的侵染力及菌株对棉株致病性的影响。结果显示，突变体菌株VdATPase的产孢量和在PDA完全培养基上的生长速率与野生型菌株相近，而在以果胶或纤维素作为唯一碳源的培养基上，突变体菌株VdATPase的生长速率明显低于野生型菌株；分泌蛋白的产量明显减少，对棉花叶片的毒性明显下降；野生型菌株对棉花植株造成的的病情指数为56.7±4.9，而致病菌VdATPase对棉株造成的致病指数只有27.5±3.6，突变体菌株的致病性明显减弱。虽然VdATPase基因的缺失对大丽轮枝菌的产孢量及生长速率没有明显的影响，但对大丽轮枝菌毒蛋白的分泌以及对棉株致萎能力的影响是显著的。本研究明确了VdATPase基因是调控大丽轮枝菌诸多蛋白分泌过程必不可少的因子，为棉花黄萎病的深入研究及防治提供了新靶点和新思路。