人工驯养树鼩睾丸亚显微结构及MCM7、Bcl-2、Bax、p21、p53基因表达的季节性差异研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sam2009009
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[目 的]探讨人工驯养成年树鼩睾丸精子在发生过程中,曲精小管的显微结构及亚显微结构变化是否存在季节性差异;探讨MCM7、Bax、Bcl-2、p53、p21基因在人工驯养的成年树鼩精子发生过程中mRNA水平和蛋白水平的表达是否存在季节性差异。[方 法]以12组不同月份的成年雄性树鼩睾丸组织为材料,采用HE染色技术对睾丸组织显微结构进行观察;采用透射电镜对睾丸组织亚显微结构进行观察;在其石蜡组织切片上进行MCM7、Bax、Bcl-2、p53、p21蛋白的免疫组化检测及MCM7、Bax、Bcl-2、p53、p21基因的DNA-mRNA原位杂交检测。[结 果]H.E染色结果显示:1月份人工驯养树鼩睾丸曲精小管中变形的精子及精子变形脱落的残质较少。2-4月份中,变形的精子数量和精子变形脱落的残质有呈逐月增加的趋势,5-8月份可观察到大量变形的精子细胞和几乎充满管腔的精子变形脱落的残质。9月份生精细胞数量、变形中的精子和精子变形脱落的残质较8月份明显减少,10月份次级精母细胞、圆形精子细胞和变形中的精子细胞较9月份又有所增加。11-12月份呈现与1月份相似的状态,变形的精子细胞数量和脱落的残质较少。透射电镜结果显示:全年12个月中,3-7月份人工驯养树鼩睾丸曲精小管中游离精子最多。8月份游离精子数量较3-7月份有所减少,但较9-12月份和1-2月份多。8-12月份和1月份人工驯养树鼩睾丸组织曲精小管中观察到部分生精细胞发生凋亡,1-2月份树鼩睾丸中偶见初级精母细胞出现壳状核仁。1-4月份和10-12月份树鼩睾丸中观察到畸形精子产生。免疫组化结果显示:MCM7蛋白在全年各个月份树鼩睾丸曲精小管中均有阳性表达信号,主要表达于精原细胞和初级精母细胞,其阳性细胞率存在季节性差异;Bcl-2蛋白在1月份树鼩睾丸曲精小管各级生精细胞无阳性信号表达信号,2-10月份主要表达于精原细胞和初级精母细胞,11-12月份主要表达于精原细胞和少部分初级精母细胞,阳性细胞率存在季节性差异;Bax蛋白在1-4月份和11-12月份曲精小管各级生精细胞中均有阳性表达,5-10月份主要在精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和圆形精子细胞表达,阳性细胞率存在季节性差异;p21蛋白和p53蛋白在各月份树鼩曲精小管中各级生精细胞上均无阳性表达信号。原位杂交结果显示:1-12月份人工驯养树鼩睾丸组织中,MCM7基因主要在曲精小管中的精原细胞和初级精母细胞中检测到阳性杂交信号;Bcl-2基因在1-12月份树鼩睾丸曲精小管的精原细胞和初级精母细胞检测到阳性杂交信号;Bax基因在2月份各级生精细胞中均检测到阳性杂交信号,1、3、9、10月份在精原细胞和初级精母细胞检测到阳性杂交信号,4-8月份在各级生精细胞中均未检测到阳性杂交信号,11-12月份在精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和圆形精子细胞中检测到阳性杂交信号;p21基因在1-2月份树鼩睾丸曲精小管的各级生精细胞中均检测到阳性杂交信号,3-5月份在精原细胞中检测到阳性杂交信号,6-9月份在各级生精细胞中均未检测到阳性杂交信号,10-12月份在精原细胞和初级精母细胞中检测到阳性杂交信号;p53基因在2-4月份和8-11月份树鼩睾丸曲精小管的精原细胞中检测到阳性杂交信号,5-7月份在曲精小管中的各级生精细胞中均未检测到阳性杂交信号,12月份和1月份在曲精小管的各级生精细胞中检测到较弱的阳性杂交信号。[结 论]1.人工驯养树鼩睾丸精子发生过程中,曲精小管在显微结构变化上存在季节性差异;2.人工驯养树鼩睾丸精子发生过程中,曲精小管在亚显微结构变化上存在季节性差异;3.MCM7、Bcl-2和Bax参与了人工驯养树鼩睾丸精子发生过程的调控,在生精细胞中的表达存在季节性差异;4.p21和p53两个基因在蛋白水平可能未参与人工驯养树鼩精子发生过程的调控。
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