花生是中国重要的油料与经济作物,由进境检疫性有害生物-冬青丽赤壳菌（Calonectria ilicicola）引致的花生黑腐病是威胁花生健康生产的重要病害。快速、准确检测检疫性植物病原菌是口岸通关及病害有效防控的重要基础。花生黑腐病和花生基腐病田间症状类似,难以区分检测。本论文探索建立特异、快速、便捷检测花生黑腐病菌的巢式PCR方法、RPA方法及区分检测花生黑腐病菌与花生基腐病菌（Fusarium neocosmosporiellum）的多重PCR方法,为满足口岸快速通关及花生黑腐病的田间准确诊断提供基础的理论依据。花生黑腐病主要依靠种子和土壤传播,难以防治。生物防治因其对环境友好愈显重要,本论文以花生黑腐病菌为靶标,初步筛选抑菌作用强、抑菌谱广的生防菌,为花生黑腐病的绿色防控提供材料和基础的依据。本论文的主要研究结果如下:1.基于花生黑腐病菌的ITS保守序列,设计特异性引物ITS-102F/444R（内侧引物）与通用引物ITS-1/4（外侧引物）组成巢式引物,对特异性引物的反应条件进行优化摸索,确定最佳引物浓度为0.1μM,退火温度50℃,反应循环数30个,建立了特异、灵敏、快速的花生黑腐的病菌巢式PCR检测体系,可检测的DNA模板最低质量浓度为10 fg/μL。2.基于花生黑腐病菌的beta-tubulin（TUB）保守序列设计特异性引物CP-F1/R1,重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification,RPA）反应体系经39℃恒温扩增20 min,苯酚/氯仿（1:1）纯化后,用2%琼脂糖凝胶能检测到清晰明亮的目的条带（134 bp）。建立了特异、便携、快速的花生黑腐病菌的RPA检测体系,可检测的DNA模板最低质量浓度为100 pg/μL。3.基于花生黑腐病菌和花生基腐病菌的calmodulin（cmd A）保守序列,分别设计特异性引物CC-F/R和NC-F/R组成多重PCR引物,对多重PCR引物的反应条件进行优化摸索,确定最佳反应条件为:反应体系浓度为1.8×、引物浓度为0.2μM、退火温度62℃、循环数37个,建立了准确、快速区分花生黑腐病和花生基腐病的多重PCR检测体系,检测灵敏度为100 pg/μL。4.以花生黑腐病菌为靶标,从健康的花生、大豆等植株体内及其根际土壤中经分离、纯化获得380株根际菌和191株内生菌,采用平板对峙法筛选获得对花生黑腐病菌抑菌作用强的9株拮抗真菌和9株拮抗细菌。以Fusarium neocosmosporiellum、Fusarium solani等8种病原真菌为供试菌,对18株拮抗菌进行了抑菌谱测定,并通过室内生测筛选获得了对花生黑腐病菌抑菌作用强,抑菌谱广,且在盆栽实验中对花生黑腐病防效显著的2株拮抗菌。利用细菌的16S r DNA基因通用引物f D2/r P1将2株拮抗细菌分别鉴定为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）和唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（Burkholderia gladioli）。