【摘 要】
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本文研究目的：1.建立稳定的NOR基因转染肝癌细胞系 pcDNA3.1(+)/NOR-HepG2。2.用基因芯片筛选转染NOR基因后肝癌细胞HepG2的差异表达基因。3.探讨NOR基因与差异表达基因之间可能的调节机制或信号通路。研究方法：1.使用稳定转染的方法将构建好的 pcDNA3.1(+)/NOR真核表达载体和pcDNA3.1(+)空白载体经脂质体介导转染入肝癌细胞HepG2，用含400 μg
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本文研究目的：
1.建立稳定的NOR<,1>基因转染肝癌细胞系 pcDNA3.1(+)/NOR<,1>-HepG2。
2.用基因芯片筛选转染NOR<,1>基因后肝癌细胞HepG2的差异表达基因。
3.探讨NOR<,1>基因与差异表达基因之间可能的调节机制或信号通路。
研究方法：
1.使用稳定转染的方法将构建好的 pcDNA3.1(+)/NOR<,1>真核表达载体和pcDNA3.1(+)空白载体经脂质体介导转染入肝癌细胞HepG2，用含400 μg/ml G418的完全培养基筛选并建立稳定的转染细胞系pcDNA3.1(+)/NOR<,1>-HepG2和 pcDNA3.1(+)-HepG2，扩大培养后用RT-PCR方法鉴定NOR<,1>基因的表达。
2.应用基因芯片筛选转染NOR<,1>基因后HepG2细胞基因表达谱发生改变的基因，并通过RT-PCR方法验证部分芯片结果。
研究结果：
1.RT-PCR结果表明通过转染建立了稳定的NOR<,1>基因转染肝癌细胞系pcDNA3.1(+)/NOR<,1>-HepG2。
2.基因芯片筛选差异表达基因发现上调的基因有59个，下调的基因有103个。这些差异表达基因的功能涉及许多个方面，包括与凋亡或肿瘤相关基因，酶活性调控基因，细胞周期调控基因，信号转导活性基因，转录活性调控基因及翻译活性调控基因等。
研究结论：
1.成功建立NOR<,1>基因稳定转染细胞系pcDNA3.1(+)/NOR<,1>-HepG2。
2.应用基因芯片技术筛选转染NOR<,1>基因后HepG2细胞的差异表达基因，对部分芯片结果进行验证，结果提示基因芯片结果假阳性率低，可信度高。
3.NOR<,1>基因转染肝癌细胞HepG2后引起HepG2细胞基因表达谱广泛改变。
4.对差异基因的分析发现NOR<,1>基因引起HepG2细胞基因表达谱中一些非常重要的信号转导通路上分子的改变，NOR<,1>基因可能通过调节这些重要的信号转导通路而参与肝癌的发生发展。
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