本研究分为二部分： 第一部分、SKF83959 对纹状体神经元IHVA的影响及其信号转导机制 目的：近年来发现磷酸肌醇（phosphoinositide，PI）耦联的D1多巴胺受体与经典D1多巴胺受体不同，它所介导的脑内功能尚不明确。SKF83959 是该新型受体的特异性激动剂，已有研究表明，SKF83959具有良好的抗帕金森病（Parkinson’s disease，PD）作用且引起的运动障碍等副作用更轻。但其具体的药理作用机制尚未完全阐明。 为进一步明确该新型受体在脑中所介导的生理功能，本实验利用全细胞膜片钳技术，研究SKF83959 对纹状体神经元上高电压激活的钙离子电流(high-voltage activatedcalcium current，IHVA)的影响。 方法：运用全细胞膜片钳技术，记录纹状体神经元上的IHVA，观察SKF83959（0.1-100μM）对IHVA的影响，以及D1受体拮抗剂SCH23390、PLCβ拮抗剂U73122、IP3受体拮抗剂heparin、Ca2+螯合剂BAPTA、calcineurin拮抗剂cyclosporin A(CsA)、L型钙通道阻断剂nifedipine等工具药对SKF83959 效应的影响，以明确SKF83959的作用机制。 结果：SKF83959（0.1-100μM）浓度依赖性抑制IHVA，这种抑制效应为电压非敏感性。D1受体拮抗剂SCH23390 完全拮抗SKF83959 诱导的IHVA抑制，而D2、α、5-HT和胆碱能受体拮抗剂对SKF83959 效应几乎不产生影响；PLCβ拮抗剂U-73122、IP3受体拮抗剂heparin、Ca2+螯合剂BAPTA、calcineurin拮抗剂CsA、L型钙通道阻断剂nifedipine均显著拮抗了SKF83959的效应。 结论：本实验从电生理角度，首次观察了激活新型PI耦联多巴胺受体对纹状体神经元IHVA的调控。SKF83959 可能是通过激活D1受体，由PLCβ/IP3/Ca2+/calcineurin信号途径介导发挥效应。这为进一步认识该新型受体在脑中介导的生理功能提供可靠依据。 第二部分、SKF83959 对纹状体神经元上Ina的影响及其信号转导机制 目的：电压门控性Na+通道是神经细胞动作电位引发、形成和传导的决定因素，对动作电位的幅度、形态起着决定性作用。纹状体是基底神经节的输入场所，调节纹状体神经元Ina在纹状体信息的整合和传递中起关键作用。多巴胺通过不同的信号转导机制广泛参与Ina调节。有关新型PI耦联多巴胺受体是否参与调节Ina的文献尚未见，本研究运用膜片钳和Western boltting 技术探讨了PI-偶联多巴胺受体激动剂SKF83959 对原代培养的纹状体神经元Ina的调控及其信号机制。 方法：运用全细胞膜片钳技术，记录纹状体神经元上的Ina，观察SKF83959（0.01-30μM）对Ina的影响，以及D1受体拮抗剂SCH23390、D2受体拮抗剂spiperone、PLCβ拮抗剂U73122、IP3受体拮抗剂heparin、蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)抑制剂bisindolylmaleimide(BIM)和chelerythrin等对SKF83959 效应的影响，以明确SKF83959的作用机制。 结果：SKF83959（0.1-30μM）浓度依赖性抑制Ina，它使Ina 稳态激活曲线向去极化方向移动，而不影响其失活曲线。D1受体拮抗剂SCH23390 显著降低SKF83959 诱导的Ina抑制，而D2受体拮抗剂spiperone对SKF83959 效应不产生明显影响；PLCβ拮抗剂U-73122、PKC抑制剂BIM和chelerythrin显著降低SKF83959的效应。 结论：本实验表明，SKF83959 可能是通过激活D1受体，由PLCβ/DAG/PKC信号途径介导发挥效应。本实验从电生理角度，首次观察了激活新型PI偶联多巴胺受体对纹状体神经元Ina的调控，为进一步认识该新型受体在脑中介导的生理功能提供可靠依据。