mPEG在同种胰岛移植免疫修饰作用研究

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目的:研究单甲氧基聚乙二醇(mPEG5000)对Wistar大鼠胰岛的免疫修饰作用及对胰岛素分泌功能的影响;探讨其对同种大鼠胰岛移植物存活的影响及其作用机制。方法:分离并纯化Wistar大鼠的胰岛,对照组不进行任何处理,处理组用20%(A组)、30%(B组)、40%(C组)三种浓度的mPEG包裹并培养,24h后分别用双硫腙染色检测胰岛细胞活性、葡萄糖刺激实验检测胰岛的分泌功能改变,取SD大鼠脾淋巴细胞分别与上述各组胰岛进行混合培养,通过杀伤试验检测胰岛免疫原性。处理组胰岛用30%mPEG包裹,阴性对照组胰岛不作处理,植入糖尿病SD大鼠模型的右后肢肌肉,空白对照组在相同部位注入生理盐水。动态监测血糖变化,病理切片检测移植物存活,通过淋巴细胞混合培养(MLC)检测免疫排斥反应。结果:与对照组相比,不同浓度mPEG包裹对大鼠胰岛活性及胰岛素分泌功能无明显影响,不同浓度处理组的胰岛细胞杀伤率均明显低于对照组(24.7%,14.8%,21.4% vs 69.5%,t=2.378,2.584,2.472,P均< 0.05),但30%mPEG处理组的杀伤率最低(14.8% vs 24.7%,21.4%,t=2.285,2.383,P均< 0.05)。mPEG包裹的胰岛移植物存活时间明显延长(75.8±4.5d vs 7.2±1.1d,P<0.05),免疫组化染色呈强阳性表达,阴性对照组移植处仅见少量阳性颗粒;而淋巴细胞刺激指数明显低于阴性对照组(1.27±0.22 vs 3.78±0.32,P<0.05)。结论:mPEG可有效掩蔽大鼠胰岛免疫原性,且不影响胰岛细胞的生物活性,具有较好的免疫修饰作用。mPEG包裹大鼠胰岛可有效延长胰岛移植物存活时间,其机制与免疫修饰作用有关。
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