【摘 要】
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目的:淋巴结状态是浸润性乳腺癌总体生存的重要预测因子。然而,仅在约一半的HER2阳性患者中检测到淋巴结受累。由于淋巴结受累的患者预后较差且复发风险较高因此我们拟通过蛋白质组学的方法探寻HER2阳性浸润性乳腺癌小肿瘤淋巴结转移相关的蛋白标志物。方法:应用非标记定量蛋白质组方法来构建10名HER2阳性小肿瘤(<2cm)乳腺癌患者(5名淋巴结转移患者与5名无淋巴结转移患者)的血浆蛋白质组。通过将不
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目的:淋巴结状态是浸润性乳腺癌总体生存的重要预测因子。然而,仅在约一半的HER2阳性患者中检测到淋巴结受累。由于淋巴结受累的患者预后较差且复发风险较高因此我们拟通过蛋白质组学的方法探寻HER2阳性浸润性乳腺癌小肿瘤淋巴结转移相关的蛋白标志物。方法:应用非标记定量蛋白质组方法来构建10名HER2阳性小肿瘤(<2cm)乳腺癌患者(5名淋巴结转移患者与5名无淋巴结转移患者)的血浆蛋白质组。通过将不同样品的蛋白质肽段化,通过独特肽段鉴定蛋白质。对比人类血浆深层蛋白质数据库及FDA认证蛋白质,同时进行显著差异蛋白互作网络分析、GO、KEGG分析。最后Western bloting验证差异蛋白。结果:筛选出388种差异蛋白质,进一步按照差异倍数log2 Fold Change>1.5,p<0.05标准筛选出33种差异表达蛋白质。蛋白互作网路分析显示23种蛋白质参与,其中有15个蛋白质在淋巴结转移数目升高样本中表达升高,8个蛋白质表达降低,并且这些蛋白质与免疫调节、补体激活、乳腺疾病、癌症通路以及淋巴结形态、淋巴结转移相关。进行GO分析、KEGG分析显示,显著差异蛋白主要与补体激活、免疫激活、酶的活性、细胞内外交换方面的功能相关。通过Western bloting验证表示FBLN5、RARB表达中淋巴结转移组均高于未转移组,WB结果与蛋白质组实验结果一致。结论:经Western bloting验证蛋白质组学实验结果具有可信性。HER2阳性乳腺癌小肿瘤淋巴结转移与免疫调节及补体途径激活有相关性。FBLN5对乳腺癌细胞的侵袭、增殖和转移产生影响。PLG/PLA系统较为复杂,PLG在HER2阳性乳腺癌小肿瘤淋巴结转移的作用需要在PLG/PLA系统中进一步研究。RARB与淋巴结形态、肿瘤通路、免疫调节、乳腺疾病均有相关性。上述蛋白应该与现有检测的手段结合,进一步大样本、多中心实验验证其作为淋巴结转移预测指标的可行性。
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