运动发酵单胞菌产乙醇的研究

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随着社会的发展,化石燃料逐渐枯竭,环境问题越来越恶化,新能源的开发已经成为各国所关注的焦点。燃料乙醇是一种清洁、可再生、可持续发展的生物质燃料,具有低碳、污染物排放较少等特点,可作为化石燃料的替代品。目前,已经有很多国家投入生产乙醇,它将成为世界各国能源消耗不可或缺的组成部分。本论文主要是以运动发酵单胞菌为发酵菌株,以廉价易得的苹果渣为原料,进行发酵产乙醇的研究。首先,从自然环境中分离到一株产乙醇的运动发酵单胞菌ZM607;然后,研究了菌株ZM607高产乙醇的发酵培养基和发酵条件;最后,研究了以苹果渣为原料,发酵产乙醇的最佳工艺参数。本论文主要的研究结果如下:(1)从土壤中分离得到菌株ZM607,经16S rDNA鉴定为运动发酵单胞菌,乙醇产量为41.1g/L。(2)通过单因素及响应面实验优化了菌株ZM607产乙醇的发酵培养基和条件。分析了葡萄糖浓度、酵母粉浓度、pH值、接种量、温度以及其他基本成分等因素对菌株ZM607发酵产乙醇的影响。在此基础上,通过Plackett-Burman实验筛选出对乙醇产量有显著影响的三个因素葡萄糖、酵母粉和温度;再利用最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域;最后通过Box-Behnken实验设计以及响应面分析,确定显著因素的最优值。得到的最佳发酵培养基和发酵条件为:葡萄糖164.4g/L,酵母粉8.2g/L,温度27℃,磷酸二氢钾1g/L,硫酸镁0.5g/L,硫酸铵1g/L,pH为7,接种量5%。此时,乙醇的最终产量为67.9g/L,比优化前提高了65.2%。(3)研究了苹果渣为主要原料的发酵工艺。通过单因素和正交实验确定了苹果渣的最佳预处理条件:第一步是进行酸水解,即pH为1,121℃下酸水解20min,还原糖含量变化率为142.8%;第二步进行酶解反应,果胶酶添加量为0.25%(底物重量),纤维素酶添加量为0.9%(底物重量),酶解温度为40℃,酶解初始pH为4.5,酶解时间12h。经过连续两种预处理可得到还原糖的含量为307.1g/kg。然后确定了发酵苹果渣糖化液生产乙醇的最佳条件:添加酵母粉8.2g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸铵lg/L,发酵温度为28℃,发酵液初始pH为6.0,接种量为5%,发酵周期为3d,最终乙醇的产量为156.8mL/kg。
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