【摘 要】
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背景糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是由糖尿病引起的慢性肾脏病,其患病人数正在逐年上升。越来越多的证据表明,炎症在DN发病机制中起重要作用。白介素-10(Interleukin-10,IL-10)作为一种抗炎细胞因子,可抑制炎症引起的组织破坏,但其确切分子机制尚不清楚,而表观遗传机制中DNA甲基化参与糖尿病肾病相关炎症基因的调节,IL-10表达与DNA甲基化有无内在联系
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背景糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是由糖尿病引起的慢性肾脏病,其患病人数正在逐年上升。越来越多的证据表明,炎症在DN发病机制中起重要作用。白介素-10(Interleukin-10,IL-10)作为一种抗炎细胞因子,可抑制炎症引起的组织破坏,但其确切分子机制尚不清楚,而表观遗传机制中DNA甲基化参与糖尿病肾病相关炎症基因的调节,IL-10表达与DNA甲基化有无内在联系是值得关注的问题。目的探讨2型糖尿病肾病大鼠肾组织IL-10的表达与DNA甲基化关系,为开辟新的糖尿病肾病抗炎治疗策略提供理论依据。方法48只清洁级健康雄性SD大鼠,体重160g-200g,月龄5-8周,自由饮水和摄食。随机分为正常对照组(NC组,n=24),糖尿病组(DM组,n=24只)。按1%链脲佐菌素40mg/kg单剂量腹腔注射诱导糖尿病模型。72h、1周后采尾静脉血测随机血糖大于16.7mmol/L、尿糖2次阳性均达标为糖尿病模型成功。造模成功后分别于0、4、8和12周末处死大鼠,检测血糖、尿糖、尿微量白蛋白、尿肌酐水平;HE、PAS、Masson、PASM染色观察大鼠肾脏在不同时间点的组织病理改变;应用免疫组化检测IL-10、DNA甲基转移酶1(DNA methylation transferase,DNMT1)的表达,并分析DN各指标相关性。结果1.一般生化指标:与NC组相比,DM组大鼠成模率75%,同时出现多饮、多食、多尿症状,且12周末DM组大鼠体重为(478.0±79.1)g,明显低于NC组(650.0±26.9)g,差异有统计学意义;DM组0、8、12周末尿微量白蛋白尿肌酐比有差异;DM组大鼠血糖于造模成功后即显著高于对照组,直至实验结束血糖仍维持在(23.0±5.5)mmol/L,差异有统计学意义。2.光镜结果:NC组不同时期光镜下大鼠肾小球、肾小管、肾间质均未见明显异常;与NC组相比,DM组肾脏病理光镜下各种染色均显示肾间水肿、炎细胞浸润,于第12周末出现肾小球基底膜轻度增厚,肾小管上皮细胞空泡变性。3.免疫组化结果:IL-10主要在肾小管的上皮细胞的胞浆表达,DNMT1表达主要在肾小管上皮细胞胞核;NC组各期肾组织IL-10表达量较同期DM组较高(P<0.05);NC组各期肾组织DNMT1表达量较同期DM组较低(P<0.05)。4.DN大鼠肾组织IL-10与DNMT1表达无显著相关(r=0.172,P=0.540)。结论2型糖尿病肾病大鼠肾组织IL-10水平下降而DNMT1水平升高,但IL-10与DNMT1表达无显著相关,可能还存在其他因素参与其中。
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