艾灸肺俞、膏肓俞对肺纤维化大鼠Wnt/β-catenin信号通路的调控效应研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:mutaozhang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  艾灸治疗肺纤维化有一定疗效优势,但仍缺乏系统深入的生物学机制研究。本课题采用艾灸肺俞、膏肓俞治疗肺纤维化模型大鼠,观察在肺纤维化疾病进程中Wnt/β-catenin信号通路对肺上皮-间质的转变作用,以及艾灸治疗对该通路关键因子的表达调控,进一步揭示艾灸治疗肺纤维化的分子调控机制。  方法:  选用2月龄SPF级SD雄性大鼠100只,体重180±20g。将大鼠随机分为4组:正常对照组(N)、模型组(M)、艾灸治疗组(A)、泼尼松治疗组(P)。除正常对照组按造模方法予以气管内一次性注射等体积的生理盐水外,其余组均予以气管内一次性注射博来霉素5mg/kg复制肺纤维化模型。从造模后第2天开始治疗,艾灸治疗组予以着肤灸肺俞、膏肓俞二穴,采用着肤灸左右交替施灸,每穴3壮,每壮5mg,每天一次;泼尼松治疗组每日予以泼尼松5mg/kg灌胃,模型组采用与治疗组相同的抓取固定方法进行干预,正常对照组不做任何干预。逐日观察并记录大鼠的呼吸、体重、精神状态等一般情况。分别于造模后第7天、第11天、第23天、第35天取材,动态观察各组肺纤维化过程中Wnt/β-catenin信号通路关键因子的表达水平。HE染色和Masson染色法观察肺组织病理变化。免疫组化法检测各组肺组织β-连环蛋白(β-catenin)表达变化。酶联吸附反应法(ELISA法)检测肺组织中β-catenin、Wnt诱导分泌蛋白-1(WISP-1)、金属基质蛋白酶-7(MMP-7)、Wnt-3a等蛋白含量。实时荧光定量PCR法检测各组β-catenin、Wnt-3a mRNA的表达水平。蛋白质印迹法(western blot法)检测WISP-1、MMP-7蛋白在各组肺组织的表达水平。  结果:  艾灸组大鼠的一般情况及呼吸状况有明显改善。模型组大鼠与正常组大鼠比较一般情况较差,体重增长缓慢,呼吸急促。与同时段模型组相比,艾灸组大鼠的呼吸、体重等一般情况指标明显改善。  病理学观察下艾灸组大鼠肺组织炎性细胞浸润和纤维化程度明显减轻。HE染色镜下观察可见:模型组肺间质中炎性细胞浸润明显,肺间质增宽。艾灸组与同时间点模型组比较,肺组织炎性细胞浸润程度明显降低(P<0.05)。Masson染色镜下观察模型组胶原纤维明显增生。艾灸组与同时间点模型组比较纤维增生程度明显减低(P<0.05)。  模型组肺组织中Wnt/β-catenin信号通路关键因子表达明显升高。模型组中肺组织β-catenin表达明显升高,在23天时达到高峰后下降,与正常对照组比较均具统计学意义(P<0.05)。模型组各时间点大鼠肺组织Wnt3a表达升高,在11天时达到最高峰,随后略有下降,与正常组比较均具有显著统计学差异(P<0.01)。模型组中MMP-7的表达逐渐升高,与正常组相比具有显著统计学意义(P<0.01)。模型组WISP-1的表达逐渐上升,在11天、23天、35天均高于正常组,具统计学差异(P<0.05)。  艾灸治疗能显著降低Wnt/β-catenin信号通路关键因子的表达。免疫组化法检测β-catenin,A11组与M11组相比具有统计学意义(P<0.05),A23天组与M23组比较具有显著统计学意义(P<0.01),但A35组与M35组比较不具有统计学差异;QPCR法检测β-catenin mRNA表达结果发现,A23组与M23组相比具显著统计学差异(P<0.01),A35天时艾灸组与模型组比较具有统计学差异(P<0.05),同时间点艾灸组与泼尼松组比较无统计学差异(P>0.05)。  艾灸各组Wnt3a的表达均低于同时间段模型组,在11天时具显著统计学意义(P<0.01),同时间点艾灸组与泼尼松组比较无统计学差异(P>0.05)。  艾灸组MMP-7、WISP-1的表达均明显低于模型组(P<0.05),同时间点艾灸组与泼尼松组比较无统计学差异(P>0.05)。  结论:  艾灸通过降低Wnt/β-catenin信号通路关键因子β-catenin、MMP-7、WISP-1、Wnt3a等表达水平,达成抗纤维化临床效应。
其他文献
在过去的几年中,降低劳动费用和提高生产率一直是矿业界研究的问题和工作的重点。开展了各种各样的工作,已使采矿工业的职工人数急剧减少。本文概述了最近几年美国采矿生产
在教育改革背景下,学生德育教育显得十分重要.本文对摄影摄像课程中德育教育的渗透方法进行分析.教师应以立德树人为首要任务,明确知识与德育教育目标,通过开展丰富多彩的实
新世纪的高中生,见识广、有胆量、有朝气,但自我意识强烈,对于说教式的德育工作形式嗤之以鼻.教师应通过怎样的方式做学生的思想工作呢?少一些空洞、教条,多一点实在、亲近,
混合式教学法是基于面对面教学和互联网教学基础上的一种创新形式,也是当前高职院校外语教学的重要研究方向.高职院校英语课堂的混合式教学,不仅可以夯实学生的英语基础知识,
目的:通过分别对体外培养条件下的骨骼肌两型肌纤维细胞的标志蛋白MHC基因同功型的检测,以探索适合骨骼肌两型肌纤维细胞的培养条件,为进一步研究两型肌纤维细胞的区别及转化机
根据技工类室内设计专业教学中的实际情况,结合自身多年的教学经验和教学总结,以培养具有创新创业能力的实用型人才为出发点,重在培养学生的实践能力,调动学生学习主动性、积
在孩子成长过程中,许多父母总想把更多的时间留给孩子学习,不让孩子做与学习无关的事情,劳动教育在很大程度上被忽视,导致一些高分低能,生活不能自理,抗挫能力弱,甚至价值观
当前高中校园内不断推进的高中数学新课改的主要目标是提升学生的数学核心素养,着重于学生能力的培养,包括迁移能力培养.迁移能力属于解决问题的思维能力,是数学学习的最核心
摘 要: 新的时期给教学工作提出了新的要求,讲求实效,提高效率,减轻学生的课业负担,全面提高教学质量。让数学课堂充满活力与效率是课题研究的主旋律。  关键词: 小学数学课堂 教学效率 教学要求  苏霍姆林斯基曾说:“应该让我们的学生在每一节课上,享受到热爱的、沸腾的、多姿多彩的精神生活。”这是怎样的一种境界呀。这是每一位教师所为之努力的方向。怎样才能让学生在数学的神奇世界里尽情遨游,让数学课堂充满
高职教育的双重属性和任务,决定了高职院校人才培养具有以知识性为基础、职业性为导向的特点,职业素养的培育贯穿整个高职教育的全过程.高职院校的班级管理应以学生特点和实