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研究目的：HE(hematoxylin-eosin,苏木素-伊红)组织化学染色分析病例组WT(Wilms’ tumor,肾母细胞瘤)肿瘤发生及演变过程中的形态学特点；研究分析儿童WT及正常肾组织DNMT1(DNA(cytosine-5-)-methyltransferase1,DNA甲基化转移酶1)基因rs16999593、rs75616428位点基因及基因型多态性；免疫组织化学分析肿瘤不同组织分型DNMT1(1a.a-148a.a)、DMAP1(DNMT1associated protein1, DNMT1相关蛋白1)及DNMT3a (DNA (cytosine-5)-methyltransferase3A,DNA甲基化转移酶3A)蛋白着色情况。研究临床Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅱ期肿瘤组织1p、16q染色体微卫星灶位点D1S1469、D1S1676、D16S3050、D16S303的LOH(loss of heterozygosity,杂合性缺失)情况。研究方法：1、肿瘤及正常肾脏组织HE组织化学染色2、肿瘤及正常肾脏组织基因组DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测。3、肿瘤及正常肾脏组织基因组DNA目的基因DNMT1(NT011295.1110291060-10291262)区段；1p、16q微卫星灶位点D1S1469、D1S1676、D16S3050及D16S303扩增及纯化。4、肿瘤及正常肾脏组织目的片段限制性内切酶法及基因测序法检测rs16999593(NT011295.1110291181)、rs75616428(NT011295.1110291113)基因型检测,统计分析用SHEsis软件进行Hardy-Weinberg遗传平衡、基因型频率、等位基因频率、连锁不平衡及单倍体分析,连锁不平衡检测采用D,值和r2值来分析。5、免疫组织化学检测DNMT1(1a.a-148a.a)、DMAP1、DNMT3a在肿瘤组织胚芽、上皮及间质组织,正常肾脏组织血管、肾小球及肾小管的着色情况,方差分析法统计肿瘤组织及正常肾脏组织中各蛋白强阳性表达差异。6、聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法检测1p、16q微卫星灶位点LOH情况,方差分析统计法分析临床Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅱ期肿瘤组织1p、16q染色体微卫星灶位点的LOH差异情况。结果：1、WT起源于后肾胚胎组织,HE组织化学染色显示肿瘤组织包含胚芽、上皮及间质多种组织形态,且以胚芽组织为主型肿瘤组织内血管成分缺无,而上皮为主型肿瘤组织内可见少量血管分布,总体上肿瘤组织内血管分布少于正常肾脏组织。2、SHEsis软件分析显示,与正常肾脏组织相比,WT组织rs16999593C/T、T/T基因频率及基因型频率明显高于正常肾脏组织(P<0.05)；两位点连锁,但rs75616428的G基因频率偏低。3、免疫组织化学显示DNMT1、DMAP1、DNMT3a蛋白主要以细胞核着色为主,从组织结构分析,三种蛋白在正常肾脏组织内的肾小球部分细胞(60%左右)、肾小管(90%以上)内皮细胞胞核都有着色,而血管内皮细胞着色甚少(35%左右)；肿瘤组织内胚芽、上皮及间质成分均有着色(80%以上)。但总体上三种蛋白在肿瘤及正常肾脏组织着色不存在差异。4、微卫星灶位点LOH检测显示肿瘤组织D16S303位点存在LOH(51.4%),且与Ⅰ-Ⅱ期患者相比,Ⅲ-Ⅴ期发生LOH人数明显高于前者(P<0.1)结论：WT是一种起源于后肾胚胎组织且包含多种组织成分的胚胎性肿瘤；尽管DNMT1rs16999593位点存在多态性,但与正常组织相比,此位点多态性不能导致裸区段在肿瘤分布出现明显差异；然而,通过检查WT患者D16S303微卫星灶位点LOH情况可为WT分期及病情评估提供参考。