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本硕士论文共分为四章,主要研究了以间氨基苯硼酸(APBA)为功能单体,壳聚糖为载体的蛋白质印迹聚合物的性质,包括制备过程、特异性识别能力、吸附选择性及吸附容量。
1,绪论:绪论部分主要介绍了分子印迹技术的理论探讨、印迹聚合物的制备和应用,并对蛋白质组学和蛋白质印迹聚合物的研究进展做了简要介绍。
2,在生物相容性较好的壳聚糖载体上合成了以APBA为功能单体、BSA为模板的蛋白质印迹聚合物,并对其静态平衡吸附性能和色谱行为进行了表征。结果表明,合成的印迹聚合物对模板蛋白的吸附选择性较高;用这种方法合成的印迹材料进行色谱装柱表征时,表现出较好的效果,在较为苛刻的流动相条件下也能表现出较好的色谱行为。在本章工作中,我们着重研究的从复杂生物样品中进行蛋白质在线分离的通用方法,有望应用于生物样品中目标蛋白的分离。
3,以APBA为功能单体,利用表面印迹技术在壳聚糖粒子上合成了牛血红蛋白印迹聚合物。朗格谬尔曲线表明,印迹聚合物对模板蛋白有较高的吸附量,在对混合竞争吸附中也表现出较高的选择性,这些结果说明在印迹材料上形成了识别BHb的特异性印迹位点。色谱流出曲线表明,装有BHb-MIP的色谱柱能够有效的将BHb从混合蛋白中分离出来,同时也说明,在完全相同的色谱条件下,印迹材料对BHb的亲和性远远高于非印迹材料,进一步的实际样品实验表明,合成的印迹材料有望从原始生物样品中分离和纯化蛋白。
4,初步研究探索了三聚氰胺的荧光光谱法检测。确定了三聚氰胺对丙烯酸的荧光增强现象,研究了两者的配比关系,得到了线性较好的标准曲线,可以实现melamine低浓度范围的检测。