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血红蛋白,是生物体内负责运输氧的一种蛋白质,由4个含血红素分子的亚基组成,具有独特的四级结构。血红蛋白有两种不同的存在状态,一种状态下血红蛋白结合了氧,叫做氧合血红蛋白,一种状态下血红蛋白是与氧分离的,叫做去氧血红蛋白。去氧血红蛋白与氧结合形成氧合血红蛋白的过程中,铁原子向卟啉环平面靠拢,卟啉环由拱顶状向平面状转化。由于卟啉环结构的变化,血红蛋白的拉曼光谱的相关谱带强度或者位置会发生变化。 血红蛋白具有变构效应,常见的别构效应分子的H+、CO2、2,3-DPG、IHP等。IHP的中文名字是肌醇六磷酸或植酸,具有促进血红蛋白结合状态氧释放的作用。本实验中利用显微拉曼光谱仪对不同氧分压下加入不同摩尔浓度植酸钠的血红蛋白溶液的拉曼光谱进行了采集,,并进行数据结果分析,可以发现:当用514.5nm激发时,当氧分压由0上升到100 mmHg,脱氧血红蛋白的特征峰1357 cm-1、1545 cm-1、1606 cm-1的拉曼峰逐渐下降,最后消失。氧合血红蛋白的特征峰1377cm-1、1587 cm-1、1640 cm-1的拉曼峰逐渐升高。通过比较不同摩尔浓度比的植酸钠与血红蛋白混合溶液的拉曼光谱检测,结果显示,对于同一浓度的血红蛋白溶液,植酸钠溶液的浓度越大对其影响越显著,即去氧血红蛋白的拉曼特征峰消失的越迅速,氧合血红蛋白的拉曼特征峰出现的越及时。通过对氧合血红蛋白的特征峰(1377 cm-1,1587 cm-1,1640 cm-1)和去氧血红蛋白的特征峰(1357 cm-1,1545cm-1,1606 cm-1)的数据进行线性拟合和峰比率计算发现,植酸的促进氧释放作用与其摩尔浓度有很好的线性关系,相关系数均大于0.910。相同氧分压下,随着植酸钠与血红蛋白的摩尔浓度值的升高,氧合血红蛋白的特征峰的峰比率升高,去氧血红蛋白的特征峰的峰比率下降。 本研究说明,植酸可以有效促进血红蛋白中氧的释放,尤其是在低氧分压下;拉曼光谱技术可以作为一种检测血红蛋白结构和功能的新手段,在研究血红蛋白血氧饱和度及异常血红蛋白病症方面有着广阔的应用前景。