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槲寄生总黄酮苷(VCF)对心脏保护作用及其作用机制。材料和方法:用水结合大孔吸附树脂制备VCF,观察VCF对完全密闭缺氧小鼠生存时间的影响;采用舌静脉注射垂体后叶素(2U/kg)制造大鼠急性心肌缺血模型观测VCF对血清中LDH、MDA、SOD的影响;采用乌头碱诱发(40μg/kg)大鼠心律失常模型,观测VCF对心电图(ECG)改变,出现室性早博时间、室速、室颤的发生率。(2)全细胞膜片钳技术研究VCF对单个心室肌细胞电压依赖性钾通道(Ito,IK1,IK)以及APD的作用。(3)用膜片钳结合RT-PCR研究VCF对单个心室肌细胞ICa-L通道电流的作用和对心肌梗死3天大鼠ICa-LmRNA表达的影响。(4)用Fluo-3/AM染料,负载心肌细胞,采用共聚焦显微镜技术和膜片钳技术首先确定血小板激活因子(PAF)对心肌细胞内钙和ICa-L的影响,并分别研究Ryanodine(200μM)、2-APB(2μM)和VCF(250μg/ml)对PAF增加心肌细胞内钙的作用和PAF增加心肌细胞内钙可能的信号传导通路。结果:(1)VCF可延长完全密闭小鼠的生存时间(P<0.05),降低垂体后叶素诱发的心肌缺血大鼠血清LDH、MDA水平,升高SOD水平。VCF组相比明显延迟乌头碱诱发的心律失常中室性早博的发生时问(2)全细胞膜片钳试验表明,VCF可增加IK电流,降低IK1、Ito电流,并轻度延长动作电位时程(APD)(3)VCF增大豚鼠ICa-L电流,RT-PCR试验表明,VCF增加ICa-L电流密度,并延缓心肌梗死大鼠ICa-LmRNA的表达的降低。(4)PAF无论在有钙和无钙台式液中,在浓度范围为10-12M~10-8M下,均可诱导心肌细胞内钙的增加,这一作用与IP3信号传到通路有关,VCF可抑制PAF诱导的心肌细胞内钙增加的作用,这与VCF阻断PAF与其心肌细胞膜受体结合有关。结论:VCF对心肌具有显著的保护作用,是一种理想的预防和治疗心律失常、心肌缺血的药物。