玉米须多糖活性以及与黄酮相互作用的研究

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玉米须是禾本科植物玉蜀黍(Zea Mays L.)的雌花的柱头,是一种应用广泛的功能性食品和中草药。它含有多种活性成分如膳食纤维、多糖、黄酮、有机酸、皂甙、生物碱等,对人体健康有重要影响。以往对玉米须多糖的研究表明,其具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、抗疲劳、抗肥胖等功效,被认为是一种潜在的功能食品。本研究旨在为玉米须多糖的充分利用提供参考。在前期证明玉米须多糖具有降血糖活性的基础上,研究了玉米须多糖的降血糖作用及其在L6骨骼肌细胞里对PI3K/Akt信号通路的调节作用。研究了纯化的玉米须多糖的结构特征及其在H2O2诱导的L6骨骼肌细胞氧化损伤中发挥的作用。通过吸附实验研究了玉米须多糖与黄酮类化合物的相互作用特性。首先,研究了玉米须多糖的降血糖作用及其在L6骨骼肌细胞里对PI3K/Akt信号通路的调节作用。从玉米须中分离得到了3个多糖组分(CSP1、CSP2和CSP3),并用凝胶渗透色谱(GPC)、红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)和气相色谱(GC)对其理化性质进行了表征。测定了其对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。并在L6骨骼肌细胞中测定了它们对PI3K/Akt信号通路以及葡萄糖摄取的影响及作用机制。结果表明,玉米须多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用(P<0.05)。玉米须多糖无细胞毒性,并且可以显著提高L6细胞对2-NBDG的摄取(P<0.05)。此外,CSP还能调节PI3K/Akt信号通路中蛋白的表达,促进GLUT4向细胞膜的转运,从而促进大鼠L6骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取。在以上三个多糖中,平均分子量为62.16 k Da的CSP2具有更好的降血糖活性。结果表明,玉米须多糖可以作为治疗2型糖尿病(T2DM)的候选药物。阐明玉米须多糖的潜在抗糖尿病作用机理,有助于其在功能性食品工业中的应用。其次,评价了玉米须多糖在H2O2诱导的L6骨骼肌细胞氧化损伤中的抗氧化活性。用DEAE sepharose fast flow柱进一步纯化了CSP1、CSP2和CSP3。得到CSP1-2、CSP2-2和CSP3-2。用一维和二维NMR对CSP2-2进行了结构分析,结果表明CSP2-2的主链由(1→6)连接的α-D-葡萄糖组成。α-D-葡萄糖的取代基由(1→3)-α-L-阿拉伯糖、(1→4)-β-D-半乳糖和(1→3,5)-β-D-甘露糖组成,以β-D-木糖和α-L-鼠李糖为端基。CSP2-2在体外具有清除DPPH和羟自由基以及抑制溶血的作用。CSP2-2可通过提高SOD、CAT和GPX的酶活性来抑制氧化损伤。罗丹明123染色结果表明,在对细胞采用H2O2的处理中,CSP2-2预处理可以使L6细胞的荧光强度增强,即可以抑制L6细胞线粒体膜电位的改变。结果表明CSP2-2可作为一种潜在的抗氧化剂,预防氧化应激损伤。最后,利用分子动力学和热力学模拟方法,研究了玉米须多糖组分(CSP1-2、CSP2-2和CSP3-2)与黄酮类化合物(木犀草素、芹菜素和刺芒柄花素)的相互作用。采用FT-IR、CD、SEM和差示扫描量热法(DSC)对玉米须多糖-黄酮复合物(P-F复合物)进行了表征。3个玉米须多糖组分的平均分子量分布分别为43.3 k Da、61.3 k Da和106.6 k Da,并且有不同的单糖组成及比例。玉米须多糖与黄酮类化合物的相互作用力主要有范德华力和氢键,可以用Langmuir方程、Freundlich方程和Clausius-Clapeyron方程等各种等温模型和热力学方程来描述。另外,这种相互作用还可以提高多糖的生物活性,如对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性。综上所述,玉米须多糖能够调节降血糖相关通路,促进糖吸收,增强抗氧化相关酶的活性,展现了良好的抗氧化活性及降血糖活性。今后将对玉米须多糖的活性及作用机制进行更深入的研究。未来对于玉米须的综合利用也将会有更深入的探索。
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