【摘 要】
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目的:研制一种可同时释放骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白7的生物活性支架,用于干细胞成骨诱导分化的应用研究。方法:制备出合适的BMP2微球(B2MS)和BMP7微球(B7MS)。采用相
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目的:研制一种可同时释放骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白7的生物活性支架,用于干细胞成骨诱导分化的应用研究。方法:制备出合适的BMP2微球(B2MS)和BMP7微球(B7MS)。采用相分离的手法制备PLGA三维多孔支架。采用改良的二氯甲烷熏蒸法,将BMP微球粘附在PLGA支架上,形成BMP2-PLGA复合支架(B2MS-PSC)和BMP7-PLGA复合支架(B7MS-PSC),并检测BMP2和BMP7的缓释效果。将人来源的骨髓间充质干细胞种植在复合支架中,研究支架上的细胞粘附能力、细胞增殖能力,及其成骨分化能力。结果:1.成功制备同时负载BMP2微球和BMP7微球的PLGA复合支架(B2B7MS-PSC)。在本次实验的9天培养过程中,在培养的第3天B2B7MS-PSC的碱性磷酸酶(ALP)明显高于不含BMP微粒的支架(P<0.05),在第6天碱性磷酸酶(ALP)高于B2MS-PSC,B7MS-PSC(P<0.01)。2.电镜观察9天后所有的样品都能展现出良好的细胞粘附形态,支架上基本所有的细胞以细胞群体的形式,粘附在三维的多孔结构空间上,细胞之间联系十分为紧密,部分细胞还能看见显著的细胞伪足结构。3.培养6天后,B2B7MS-PSC上细胞的增殖能力高于其它支架(P<0.01),4.细胞培养第9天B2B7MS-PSC支架的1型胶原蛋白(COL-1,collagen type-1)、骨钙素(OCN,osteocalcin)、骨保护素(OPG,osteoprotegerin)和骨桥蛋白(OPN,osteopontin)表达明显高于B2MS-PSC或B7MS-PSC支架(P<0.05)结论:1.成功制备一种可同时释放BMP2和BMP7的可用于骨修复的生物活性支架。2.该支架能够成功诱导人骨髓间充质干细胞进行成骨分化,其诱导细胞增殖能力和成骨分化能力均优于单独一种BMP释放的支架。
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