利用产业化的重组人干扰素素α2a工程菌PBE918／BMH7118经发酵表达后的菌体为初始物，建立重组人干扰素α2a的分离纯化工艺。 本实验设计了三种无单克隆抗体亲和层析的重组人干扰素α2a分离纯化工艺。纯化路线Ⅰ菌体裂解后采用离子交换层析、反相柱层析和凝胶过滤层析将提取的干扰素纯化。结果目标蛋白比活性为1.75×10~8IU／mg，累积纯化55倍。SDS-PAGE检定呈一条带，其分：产质量约为19kD，纯度达到95％以上。HPLC检测纯度为97.00％，总回收率达38.6％。 纯化路线Ⅱ菌体裂解后用疏水层析、离子交换层析、反相柱层析和凝胶过滤层析将提取的干扰素纯化。结果目标蛋白比活性为2.22×10~8IU／mg，累积纯化70倍。SDS-PAGE检定呈一条带，其分子质量约为19kD，纯度达到95％以上。HPLC检测纯度为97.75％，总回收率达23.9％。 纯化路线Ⅲ用7mol／L盐酸胍抽提干扰素，然后用金属螯合层析、离子交换层析、反相柱层析和凝胶过滤层析将提取的干扰素纯化。结果目标蛋白比活性达2.36×10~8IU／mg，累积纯化180.2倍。SDS-PAGE检定呈一条带，其分子质量约为19kD，纯度达到97％以上。HPLC检测纯度为97.83％，总回收率为32.0％。 纯化路线Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ终产品的电泳纯度和HPLC纯度都在95％以上，比活性在1.0×10~8／IU／mg以上。这两项指标都达到了2000年版《中国生物制品规程》的要求。这三条纯化路线相互比较，纯化路线Ⅲ终产品的比活性最高；纯化路线Ⅰ的终产品比活性最低，故不选路线Ⅰ为最佳工艺。纯化过程活性收率纯化路线