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目的:探讨黄芪多糖(APS)对衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF)端粒长度及P16基因外显子(exon)Ⅰ甲基化水平的影响。
方法:MTT法测细胞活力;免疫组化法测衰老相关β-半乳糖苷酶(SAβ-gal)染色阳性细胞数;应用Southern印迹杂交测基因组DNA末端限制性片段(TRF)长度;应用甲基化敏感的DNA限制性内切酶与PCR相结和的方法,分析特定位点的甲基化状态。
结果:黄芪多糖提高了HDF细胞的最大寿限;增强了细胞的活力;降低了SAβ-gal阳性细胞数;HDF衰老过程中,TRF长度明显缩短,P16基因外显子Ⅰ限制性内切酶SmaⅠ位点的甲基化水平则表现出随增龄而降低的趋势,黄芪多糖作用组使端粒的缩短速度降低了,上述位点的甲基化水平有所提高。
结论:黄芪多糖可以通过减慢端粒缩短速度,提高DNA甲基化水平来延缓细胞的衰老。