酒精的过量摄入会引起各种酒精性疾病,其中由酒精引起的酒精性肝脏疾病严重威胁着人类健康。在课题组之前的实验中,我们发现在小鼠酒精性脂肪肝诱导模型中,肝组织Periostin蛋白的表达量明显升高。然而,敲除Periostin蛋白后,酒精诱导下肝脏中的脂滴沉积明显加重,肝脏受损亦更加严重。因此,我们推测,Periostin蛋白在酒精肝模型中可能发挥了一定的保护作用。在本课题中,我们进一步检测发现,敲除Periostin明显加重小鼠酒精性肝病中肝组织的内质网应激反应,并导致更多的细胞凋亡发生。上述研究结果表明,敲除Periostin蛋白可显著加重小鼠酒精性肝病的表型,酒精诱导的Periostin表达上调在酒精性肝病中可能发挥保护功能。在此基础上,我们进一步探究Periostin表达上调的机制。我们通过预测分析发现,在Periostin基因的启动子区可能存在转录因子TFEB的结合位点,提示TFEB可能对Periostin表达发挥了一定的调控作用。作为一种转录因子,TFEB参与调控溶酶体的生物发生、自噬体与溶酶体的结合等过程,在酒精性肝病中也具有重要功能。我们通过检测发现,在酒精喂养或处理后,小鼠肝脏组织和小鼠正常肝细胞系中的TFEB及其下游靶基因的表达量都有显著性上调,并且双荧光素酶报告基因实验结果发现TFEB对Periostin启动子发挥了一定的调控作用,因此我们认为,在酒精性脂肪肝中,TFEB可能作为上游基因调控了 Periostin的表达上调。为进一步探究Periostin对酒精性肝病的调控机制,我们从筛选Periostin相互作用蛋白入手以探寻Periostin的下游靶基因或信号分子。我们运用基于BioID的邻近蛋白质组学技术,通过分子克隆与细胞培养等技术,将Periostin的邻近蛋白生物素化,然后通过亲和珠富集生物素化的蛋白,通过质谱技术进行鉴定,最后筛选到Periostin相互作用蛋白的候选分子。经过分析,我们共得到152个候选蛋白,并对它们从细胞组分、分子功能、生物学过程等方面进行了相关的生物信息学分析,为下一步深入探索下游信号通路及阐明Periostin在酒精性肝脏疾病中的作用机制奠定了基础。