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第—部分 小鼠胰岛移植模型的建立 目的 探讨提高小鼠胰岛分离数量和质量的可靠方法,构建小鼠胰岛移植的模型。 方法 采用胆管内胶原酶灌注和Histopaque 1077密度离心法分离纯化胰岛。分别观察供体的体重、胶原酶的浓度、消化的时间、温度和胰岛培养时间对胰岛分离数量及移植效果的影响。通过葡萄糖刺激胰岛素分泌试验和肾包膜下移植评价分离的胰岛功能。 结果 高体重供体组胰岛的收获量显著高于低体重供体组(166.5±23.47 vs 89.83±7.65个;P<0.01)。胰岛活率≥95%。胶原酶浓度、消化时间对胰岛收获量起重要作用。高糖组(16.7mmol/L)胰岛素释放量为低糖组(3.3mmol/L)的2.9倍(29.49±5.61 vs 10.07±3.14ng·/10个/h)。同种异体胰岛移植的糖尿病小鼠高血糖状态得到逆转,提示胰岛的β细胞具有良好功能。培养12~24小时胰岛与培养2~4小时胰岛的葡萄糖刺激胰岛素释放量无统计学差异,但前者在移植给同种异体小鼠后血糖恢复较后者更加迅速而优良。 结论 小鼠的体重、胶原酶的浓度、消化时间和温度是影响胰岛数量和功能的重要因素。短时间培养能够提高胰岛移植的效果。