【摘 要】
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目的:USP10（Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 10）是去泛素化酶家族中的一员,近期研究已经表明USP10在肿瘤发生发展中起着至关重要的作用。本研究发现USP10能通过调控MSI2（Musashi-2）在结肠癌中的表达而影响结肠癌的发生发展,为结肠癌的治疗提供新的理论基础。方法:通过q RT-PCR和Westernblot分析结肠癌患者配对样本的USP
【基金项目】
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国家自然科学基金（81220108021, 2017ZX10203206）；
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目的:USP10（Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 10）是去泛素化酶家族中的一员,近期研究已经表明USP10在肿瘤发生发展中起着至关重要的作用。本研究发现USP10能通过调控MSI2（Musashi-2）在结肠癌中的表达而影响结肠癌的发生发展,为结肠癌的治疗提供新的理论基础。方法:通过q RT-PCR和Westernblot分析结肠癌患者配对样本的USP10和MSI2的表达情况。运用免疫荧光技术定位结肠癌细胞中USP10和MSI2的表达;运用免疫共沉淀技术及体外His pull-down技术验证USP10对MSI2的稳定作用,探索具体的去泛素化机制。分别使用敲低USP10和MSI2的LOVO结肠癌细胞系,通过CCK-8、平板克隆等实验方法来检测USP10和MSI2对结肠癌细胞功能的影响,并通过补回MSI2来验证USP10对MSI2的特异性去泛素化修饰作用。结果:q RT-PCR和Westernblot分析结肠癌患者配对样本的数据分析表明,结肠癌组织中MSI2蛋白表达水平与USP10蛋白表达水平相关,且都高于正常组织。USP10能与MSI2相互作用,且USP10对MSI2的稳定作用呈剂量依赖型。USP10通过泛素的Lys-48特异性去泛素化修饰MSI2。分别敲低USP10和MSI2的结肠癌细胞系,其增殖能力均明显降低;且在敲低USP10的细胞系中补回MSI2后,其增殖能力与对照组相比无明显差异。结论:鉴于USP10在结肠癌发生发展中的重要性,我们有望在未来发展USP10作为结肠癌的治疗性靶点。
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