论文部分内容阅读
噪音刺激诱发的听力损伤(NIHL)是排在首位的职业疾病,也是导致老年性耳聋的主要因素。遭受这类耳聋疾患困扰的人数占世界总人数的比例很大,仅美国就有三千万患者。目前临床上仍无有效的预防和治疗噪音导致听力损伤的药物。哺乳动物听觉中枢的耳蜗橄榄核发出的传出神经通路对保护NIHL起着重要的作用,该传出神经通路分为两类:(1)神经胞体位于耳蜗橄榄核的侧面(LOC),传出神经纤维与内毛细胞(IHC)基部的传入神经元的树突发生突触连接(轴-树突触);(2)神经胞体位于耳蜗橄榄核的腹侧近中部(MOC),传出神经纤维直接与外毛细胞(OHC)的底部发生突触连接(轴-体突触).神经元烟碱乙酰胆碱能受体(nAChRs)是LOC和MOC传出神经反馈调节通路的关键组分,由α9、α10组成的nAChRs分布在听觉外毛细胞(OHC)的基部,它们是MOC传出通路中参与正常听觉过程和防止噪音刺激损伤调节的关键分子。含β2亚基的nAChRs分布在LOC传出神经末梢,它们与NIHL的关系仍不明确。
本课题旨在研究含β2亚基的nAChRs在LOC传出神经通路中对NIHL的作用。实验选用2月和9-10月龄β2-/-B6.CAST(β2-/-)和B6.CAST雌性小鼠,给予相同的噪音刺激(db110 SPL,0.2-70kHz,30 min),用电生理方法测定听觉阈值漂移,用组织细胞学和体视学方法分析计数IHc,OHC和螺旋神经元(SGN),比较β2-/-与B6.CAST小鼠在噪音刺激后耳蜗细胞的病理变化。该研究的新发现是:(1)9月龄的β2-/-与B6.CAST小鼠比较,β2-/-小鼠对噪音刺激有显著的保护作用。(2)LOC调节通路中的含β2亚基的nAChRs对NIHL的保护作用很小或无。(3)9月龄的β2-/-小鼠对NIHL的保护作用是由于β2-/-小鼠体内皮质类固醇激素浓度显著高于B6.CAST小鼠的缘故。(4)高浓度血清皮质类固醇激素显著性地保护IHC,使IHC免遭噪音刺激的损伤,但它对OHC的保护较弱。(5)慢性的持续性应急激素浓度升高,将导致SGNs的退化和丧失,提示临床使用皮质类固醇激素治疗NIHL时要在治疗窗口期尽量缩短用药时间。
细胞内的应急通路对保护NIHL发挥着重要的作用,细胞内的钙离子浓度的失调被广泛认为是噪音导致耳蜗细胞损伤的一个重要因素。在另一项研究中我们把2-3月龄C57BL/6J小鼠按性别随机分成预防组组、治疗组和对照组,在噪音刺激前和刺激后,分别给小鼠饮用含有TMO或ET药物的水。预防组小鼠在噪音刺激前两周开始饮用药水,治疗组在噪音刺激后饮用药水两周,对照组饮用普通的水。TMO和ET是FDA已批准的两种治疗癫痫的药物,属于T-type Ca2+通道阻断剂。这项实验的目的是试验两种药对NIHL的预防和治疗作用。研究发现:(1)在噪音刺激前,给小鼠喂饮两周韩TMO的药水,预防组和对照组再给予同样的噪音刺激,ABR的结果表明,雄性和雌性小鼠都表现出对NIHL有显著的预防保护作用。(2)治疗组小鼠ABR的结果显示,在噪音刺激后饮用TMO或ET两周,雄性和雌性小鼠都对NIHL有明显的保护作用,但有性别的差异,雄性小鼠的保护作用比雌性小鼠的保护作用更为显著。(3)IHC,OHC和SGN的定量分析结果显示TMO的保护作用主要体现在保护OHC,而喂药组小鼠的IHC,SGN的密度与对照组无显著差异。(4)RT-PCR和免疫细胞化学结果显示SGNs表达T-type Ca2+通道的α1G,α1H,α1I亚基,柯迪氏器表达α1G,α1I亚基,提示T-type钙离子通道阻断剂可能直接与Ca,3钙通道的α1亚基发生作用。我们的发现为临床研究预防和治疗NIHL的药物提供了基础。