背景:表皮样生长因子（EGF-like factors）可以体外诱导哺乳动物卵母细胞成熟,并且可以提高卵母细胞成熟质量。研究发现,促黄体激素（luteinizinghormone,LH）可以诱导卵泡中颗粒细胞快速且短时的表达三种EGF生长因子,分别是双调蛋白（amphiregulin,AREG）、上皮调节蛋白（epiregulin,EREG）和β细胞素（betacellulin,BTC）。目前已知小鼠中,卵泡颗粒细胞分泌的EGF样生长因子中AREG的表达最丰富,也是对卵母细胞成熟和发育促进作用最显著的分子。本课题组前期研究证实小鼠卵泡颗粒细胞内的组蛋白去乙酰化酶3（histone deacetylase 3,HDAC3）受LH峰影响被下调时,即会解除颗粒细胞对AREG的表达抑制作用,从而促进其分泌,最终导致卵丘扩展和卵母细胞成熟。该研究表明HDACs对卵泡发育及卵母细胞的成熟具有重要的调控作用,但有关HDACs家族成员在滩羊卵泡发育及卵母细胞成熟方面的作用研究尚不多见。目的:本研究旨在探究HDACs家族成员HDAC3和HDAC8在滩羊各级卵泡中的定位与表达模式,以及颗粒细胞中HDAC3和HDAC8对AREG表达的关系,以便为深入开展滩羊卵泡发育及卵母细胞成熟调控的表观遗传修饰机制研究提供参考。方法:本研究以滩羊为研究对象。利用卵巢组织和体外培养的原代颗粒细胞,结合免疫组织化学、免疫荧光、蛋白免疫印迹、ELISA、q-PCR等技术开展以下研究:LH对滩羊卵巢颗粒细胞AREG表达的影响;HDAC3和HDAC8在滩羊生长卵泡中的定位与表达;HDAC3和HDAC8调控滩羊卵巢颗粒细胞分泌AREG的作用及潜在机制。结果:（1）滩羊卵巢各级卵泡中AREG表达随卵泡发育逐步上调且体外原代颗粒细胞培养实验表明,LH可诱导颗粒细胞表达AREG。提示AREG同样参与了 LH诱导滩羊卵泡成熟的过程。（2）HDAC3主要定位于各级卵泡（含原始、初级、次级及有腔卵泡）体细胞（颗粒细胞和卵丘细胞）细胞质中,且表达水平随卵泡发育逐步上调,在排卵前卵泡中表达最高。LH可下调颗粒细胞中HDAC3的表达。体外培养条件下,抑制HDAC3的活性可促进颗粒细胞中AREG的水平及H3K14的乙酰化水平升高。（3）HDAC8主要定位于各级卵泡（含原始、初级、次级及有腔卵泡）体细胞（颗粒细胞和卵丘细胞）细胞质中,且颗粒细胞中HDAC8的表达水平伴随卵泡发育逐步下调。LH可下调颗粒细胞中HDAC8的表达;抑制HDAC8后颗粒细胞中AREG表达水平虽无显著变化,但H3K14的乙酰化水平上调。结论:在滩羊卵巢颗粒细胞中,LH对HDAC3和HDAC8的蛋白表达都有下调作用,但作用机制不同。其中,LH可通过下调HDAC3的表达间接上调H3K14的乙酰化水平,进而促进AREG表达;LH虽可下调颗粒细胞内HDAC8的表达上调H3K14的乙酰化修饰,但不参与对AREG的表达调控。本研究为深入揭示HDACs家族成员参与促性腺素诱导滩羊卵母细胞成熟的作用及机制奠定了基础。