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目的:通过研究中成药护心康对Ox-LDL刺激的巨噬细胞mTOR信号通路中Beclin1、LC3Ⅱ水平的影响,探讨与分析护心康抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:SD雄性大鼠20只,随机将其分为护心康组和正常组,每组各10只;两组大鼠分别用护心康、蒸馏水灌胃7天后,采血分别分离含药血浆和空白血浆。培养人的单核细胞(THP-1),用费波酯(PMA)诱导分化成巨噬细胞,通过采用流式细胞术检测细胞表面CD14的表达率来鉴定单核细胞是否分化成功。Ox-LDL刺激巨噬细胞24h建立体外高脂模型,用油红0染色观察细胞对脂质的吞噬。造模成功后,将细胞分为模型组、对照组、低、中、高剂量中药组、抑制剂组、他汀组,分别给予RPMI1640完全培养基、15%空白血浆+RPMI1640基础培养基、6%、9%、12%护心康含药血浆+RPMI1640基础培养基、含抑制剂(雷帕霉素)、阿托伐他汀的RPMI1640完全培养基培养;另外取未造模的正常细胞,设置正常空白组与正常中药组,分别用RPMI1640完全培养基、12%含药血浆+RPM11640基础培养基,RPMI1640完全培养基中含15%胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),RPMI1640基础培养基不含血清(血浆),所有组培养基终浓度均为15%,不足用FBS补足。各组干预8h、24h、48h后检测胆固醇含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Beclin1、LC3Ⅱ蛋白浓度。结果:(1)流式细胞术检测结果显示:PMA诱导组细胞表面CD14的表达率明显高于未诱导组(P<0.01)。(2)油红0染色观察可见Ox-LDL刺激后细胞脂质明显增多。(3)胆固醇含量检测:低、中、高剂量中药组、他汀组、抑制剂组的胆固醇含量明显比对照组低(P<0.01);他汀组的胆固醇含量比高剂量中药组低(P=0.007),而低剂量中药组的胆固醇含量比抑制剂组低(P=0.04),且低、中、高剂量中药组胆固醇含量随含药血浆浓度增加而降低(P<0.01)。中药组、他汀组及抑制剂组24h的胆固醇含量比8h的降低(P<0.01),中药组48h的胆固醇含量比24h低(P<0.05),他汀组及抑制剂组的胆固醇24h与48h差异不显著(P>0.05),护心康降脂作用较阿托伐他汀、雷帕霉素更持久。(4)Beclin 1、LC3Ⅱ蛋白浓度:低、中、高剂量中药组、抑制剂组、他汀组与对照组比较Beclin 1、LC3Ⅱ蛋白浓度均明显增加(P<0.01);三药对Beclin 1蛋白分泌作用无显著差异(P>0.05),雷帕霉素、阿托伐他汀分泌LC3Ⅱ作用强于护心康(P<0.05)。中药组、他汀组、抑制剂组Beclin 1、LC3Ⅱ在24h时蛋白浓度明显高于8h(P<0.05);他汀组、抑制剂组48h的Beclin 1、LC3Ⅱ蛋白浓度比24h低(P<0.05),而中药组24h与48h相差不显著(P>0.05),护心康促进Beclin 1、LC3Ⅱ的分泌作用更持久。(5)Beclin 1、LC3Ⅱ的相关性分析:Beclin 1、LC3Ⅱ的浓度在低、中、高剂量中药组中呈正相关(r=0.670,P<0.01)。结论:护心康不仅可以降低巨噬细胞内胆固醇,还可通过抑制mTOR信号通路,增加Beclin 1、LC3Ⅱ蛋白的分泌,促进巨噬细胞的自噬,而起到抗AS的作用。