论文部分内容阅读
背景和目的:恶性肿瘤的发生是一个多阶段,涉及遗传学及表遗传学的复杂过程。近年来,DNA甲基化在恶性肿瘤发生,发展中的作用越来越受到重视,CpG岛高度甲基化被认为是抑癌基因失活的一个新机制[1]。细胞周期素A1(Cyclin A1,CCNA1)在多种恶性肿瘤中发现存在较高的甲基化率。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一[2,19],并且是女性因癌症死亡的第二位死因(15%),仅次于肺癌。近年来,其发病率呈逐年上升。因此,国内外关于乳腺癌的研究已经成为女性恶性肿瘤领域的热点。CCNA1即细胞周期素A1,参与细胞周期调控;调节DNA合成和促进细胞进入分裂期,与CDK2 (cyclin-dependent kinases-2)特异相互作用,可结合重要的细胞周期因子,如Rb家族蛋白,转录因子E2F-1 ,P21家族蛋白等[3]。有研究证实CCNA1在前列腺癌侵袭和转移中起了很重要的作用,主要通过增强MMPs,UpA,VEGF的表达而促进肿瘤侵袭和转移[4,5,23]。因在乳腺癌中研究较少,本文旨在对乳腺癌组织中CCNA1基因启动子甲基化检测。以探讨其与乳腺癌转移的相关性。方方法:1.采用Qiagen-FFPE的步骤提取95例石蜡包埋乳腺癌组织及癌旁组织的基因组DNA。2.用甲基化敏感性限制性酶切—PCR对所提DNA进行CCNA1基因甲基化检测。3.采用巢式PCR扩增目的片段,并对扩增片段进行DNA纯化和测序。4.采用1.5 %琼脂糖凝胶电泳,30 min后在紫外灯下观察结果。结果:1.乳腺癌组织中CCNA1基因启动子甲基化的阳性率为90.9%(86/95),而癌旁乳腺癌组织CCNA1基因甲基化的阳性率为10.5%(10/95),显著低于癌组织。2.CCNA1基因启动子甲基化与淋巴结转移( P=0.019)及远处转移有关( P=0.032)3.在乳腺癌中未筛查到CCNA1基因启动子突变。结论:CCNA1基因甲基化参与了乳腺癌的发生,发展,可能起到了抑癌基因的作用,并且有淋巴结转移和远处转移多见的显著特征,CCNA1基因甲基化与乳腺癌转移相关。