据研究调查表明,肾病已经渐渐成为困扰人们日常生活和健康的重要疾病之一,而肾脏是维系人体生命代谢与活力的重要器官,一但病变,往往会引发严重的代谢疾病、免疫疾病等。微生态制剂是近年来广受好评的功能性保健医疗产品,具有很多不同的功能,它们改善在肠道健康的同时,会对不同的疾病有预防或辅助治疗的作用,但目前还没有可降低血清肌酐的益生菌报道,而血清肌酐是评估肾功能的重要指标。课题组筛选出一株动物双歧杆菌WBBR04,本文通过建立动物肾病模型,确定其具有促进肾脏恢复,降低血清肌酐的功能后,拟在转录组和蛋白组数据的基础上,探究其降低血清肌酐的分子机制。实验证明,动物双歧杆菌WBBR04对嘌呤造模的肾脏疾病有恢复作用,动物双歧杆菌WBBR04灌胃的小鼠治疗组与模型组相比尿素氮和肌酐含量都显著降低;肾脏纤维化程度明显降低,肾脏细胞的炎性浸润程度显著恢复;转录组显示了3176个差异表达基因,而蛋白质组显示了178个差异表达蛋白,证明了动物双歧杆菌WBBR04能够改变肾脏相关蛋白的表达水平。为了探究动物双歧杆菌WBBR04降低血清肌酐的分子机制,首先利用荧光定量、免疫组化和蛋白印迹验证阴离子转运蛋白SLC22A8在灌胃动物双歧杆菌WBBR04的小鼠肾脏中表达上调,再通过灌胃后的小鼠血清进行体外细胞实验,Transwell小室验证得出灌胃动物双歧杆菌WBBR04的小鼠血清促进肾细胞Renca转运肌酐,而添加SLC22A8的药物抑制剂indomethacins后,转运效率显著下降,说明SLC22A8是动物双歧杆菌WBBR04降低血清肌酐的关键蛋白。通过高效液相色谱,发现灌胃动物双歧杆菌WBBR04的小鼠血清成分有变化,进一步气质联用色谱分析发现,血清成分差异最大的化合物是Methylenebis（2,4,6-triisopropylphenylphosphine）。综上,动物双歧杆菌WBBR04能与肠道细胞相互作用后,通过改变了小鼠血清的组成,从而提高了肾脏中SLC22A8等离子转运蛋白的表达量,帮助恢复肾脏的机能,降低血清肌酐。为后期开发动物双歧杆菌WBBR04的工业应用,本文摸索优化该菌的酸奶发酵工艺,得到了发酵奶的最佳配方为接种量3%,发酵温度42°C,发酵时间10 h,奶粉浓度25%,加蔗糖量3%。发酵乳的口感细腻柔和,酸度适宜,香味浓郁,适宜大众的选择。通过本文的研究,动物双歧杆菌WBBR04可以促进肾病小鼠肾脏恢复,并且降低血清肌酐,故这一独特的菌株可以作为辅助治疗肾病的微生态制剂的备选菌株。同时我们初步探究了动物双歧杆菌WBBR04降低小鼠血清肌酐的途径,为下一步进行临床试验并阐明益生菌治疗肾病的分子机制提供了理论借鉴,最后,我们优化动物双歧杆菌WBBR04发酵乳工艺,为商业开发该菌株奠定了技术基础。