研究目的:通过文献综述,系统掌握中医关于缺血性中风治疗学问题的理论和现代研究进展,使我们的研究工作尽可能立足于学科前沿.通过实验观察,系统研究中医益气活血法在不同层次、不同靶点、不同时间段对缺血性中风的作用情况,并以神经细胞凋亡为切入点,在分子生物学层次上阐明其作用机制,力求为临床合理运用益气活血法治疗缺血性中风进而提高临床疗效,为开发中药新药提供更科学的理论与实验依据.主要研究方法:宏观研究方法是:对模型鼠存活率、体重、神经系统体征、气虚证、血瘀证的观察.微观研究方法是:对模型鼠血液流变学、HE、电镜、流式细胞术、TUNEL法、酶标法、免疫组化染色、原位杂交的检测.动态研究方法是:采用饥饿、劳累、高脂饮食等多因素复合制出气虚血瘀证模型,然后用线栓法阻断大脑中动脉制作出局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为缺血再灌注1天、3天、7天假手术组、模型组、益气组、活血组、益气活血组,动态观察益气活血法对缺血再灌注损伤的保护作用和抗神经细胞凋亡的作用及机理.数学研究方法是:图像分析系统和SPSS 11.0 for Windows软件处理.结论:实验结果显示,益气法、活血法、益气活血法对脑缺血再灌注损伤均有明显疗效,以益气活血法疗效最为显著.通过流式细胞仪对模型鼠缺血半暗带神经细胞凋亡率进行定量研究,TUNEL染色对神经细胞凋亡生化特性的定性研究,及电镜对海马CA1区神经细胞凋亡形成过程的动态观察,结果表明,益气法、活血法、益气活血法有较好的抑制神经细胞凋亡的作用,以益气活血法作用效应最为显著.通过对脑组织NO含量的检测,用免疫组化染色法对eNOS、iNOS蛋白的检测结果,提示益气活血法能提高eNOS蛋白的表达,降低iNOS蛋白表达水平,降低脑组织NO含量,是其抗神经细胞凋亡的机制之一.通过免疫组化及原位杂交法对促凋亡、抑凋亡基因的表达,并结合图像分析发现,益气活血法通过抑制促凋亡基因bax、p53、caspase-3蛋白的表达,促进抑凋亡基因bcl-2mRNA及蛋白的表达,是其抑制缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的基因调控机制.