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目的探讨伏立诺他联合PI3K抑制剂NVP-BEZ235对T淋巴细胞生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法体外培人T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat细胞,用不同浓度伏立诺他或(和)NVP-BEZ235孵育后,采用MTS观察两者单独用药或联合用药对细胞的增殖的影响,并计算药物的联合指数;选取联合用药后细胞半抑制浓度(IC50)组合用于下一步研究,包括流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测
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目的探讨伏立诺他联合PI3K抑制剂NVP-BEZ235对T淋巴细胞生长增殖的影响,并探讨其作用机制。方法体外培人T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat细胞,用不同浓度伏立诺他或(和)NVP-BEZ235孵育后,采用MTS观察两者单独用药或联合用药对细胞的增殖的影响,并计算药物的联合指数;选取联合用药后细胞半抑制浓度(IC50)组合用于下一步研究,包括流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测PI3K/Akt以及FOXO3a磷酸化,采用免疫检测FOXO3a的核转位,Western blot检测Bim1的表达。最后采用RNA干扰Bim1,观察其Jurkat细胞增殖的影响。结果1.0.12,0.24,0.36,0.48和0.6μmol/L伏立诺他和6,12,18,24,30nmol/L NVP-BEZ235对Jurkat细胞的生长增殖具有协同作用,其中伏立诺他和NVP-BEZ235对Jurkat细胞半抑制浓度组合分别为0.48μmol/L和24nmol/L。2.伏立诺他或(和)NVP-BEZ235也可促进Jurkat细胞凋亡。3.伏立诺他或(和)NVP-BEZ235能抑制PI3K/Akt和FOXO3a磷酸化,并能诱导FOXO3a核转位,并上调Bim1的表达,沉默Bim1后,可明显逆转伏立诺他和NVP-BEZ235对Jurkat细胞生长的抑制效应。结论1.伏立诺他对PI3K抑制剂NVP-BEZ235抑制Jurkat细胞生长具有协同作用;2.伏立诺他能协同NVP-BEZ235诱导Jurkat细胞凋亡,其机制与影响PI3K/Akt/FOXO3a/Bim1通路有关。
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