利用PEF技术快速提取食用家畜DNA的实验研究

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本文在综合比较各种DNA提取方法的基础上,提出了适用于家畜组织DNA提取的简单方法,即改进方法。然后,在改进方法的基础上引入高压脉冲电场(High Intensity Pulsed Electric Fields,PEF或HIPEF)技术,将其应用于牛、羊、猪三种家畜的脾脏、肉和肝九种组织的DNA提取,通过与常规方法的比较以及对提取到的DNA进行琼脂凝胶电泳和紫外吸收检测,并结合PEF处理过程中溶液电导率和细胞形态的变化,验证了PEF方法和牛脾脏作为最佳DNA提取材料的可行性。通过单因素试验、正交试验和二次通用旋转组合设计,确定了PEF方法提取牛脾脏DNA的最佳工艺参数为:电场强度为30kV/cm、脉冲数为8、料液比为1:5.2(g:ml)、加热温度65℃,该条件下DNA的提取率最大为4.25mg/g。该方法同传统的SDS方法相比,提取率高,耗时短,操作简单,是一种很有希望的食用DNA提取方法。
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